[发明专利]一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒

权利要求书

1、微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒，包括包被抗原、微囊藻毒素-LR多克隆抗体或单克隆抗体以及酶标二抗；

所述包被抗原为完全抗原A；所述完全抗原A按照如下方法制备：在微囊藻毒素-LR的第七位氨基酸残基N-甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基，得到经氨基修饰的微囊藻毒素-LR；再将该经氨基修饰的微囊藻毒素-LR与载体蛋白偶联得到所述微囊藻毒素-LR与载体蛋白的偶联物，即完全抗原A。

2、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述微囊藻毒素-LR多克隆抗体或单克隆抗体是以所述完全抗原A为免疫原得到的抗体；

所述微囊藻毒素-LR单克隆抗体按照下述方法制备：用所述完全抗原A免疫小鼠，取免疫小鼠的脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选出阳性杂交瘤细胞株；培养所述阳性杂交瘤细胞株或将所述阳性杂交瘤细胞株注入同系小鼠腹腔诱生腹水，得到微囊藻毒素-LR的单克隆抗体。

3、根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述载体蛋白为牛血清白蛋白；所述偶联方法为戊二醛法。

4、根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述用于免疫的小鼠为Balb/c小鼠；免疫方法为：每只小鼠每次免疫所用的所述完全抗原剂A量为15-40μg，两次免疫的间隔时间为20-40天；免疫方式为皮下多点注射；

所述步骤2)中的小鼠骨髓瘤细胞为小鼠骨髓瘤细胞SP2/0。

5、根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述筛选阳性杂交瘤细胞株的方法为：先用包被抗原筛选，再用微囊藻毒素-LR单体筛选至少1次；所述包被抗原为将所述步骤1)中的经氨基修饰的微囊藻毒素-LR多肽与载体蛋白偶联得到的完全抗原B；所述完全抗原B与所述完全抗原A中的载体蛋白不相同。

6、根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述完全抗原B中的载体蛋白为卵清白蛋白。

7、根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述阳性杂交瘤细胞株为能分泌抗Microcystin-LR单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株MC8C10，其保藏号为CGMCCNo.2101。

8、根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述微囊藻毒素-LR单克隆抗体为由保藏号为CGMCC No.2101的能分泌抗Microcystin-LR单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株MC8C10产生的抗体。

9、根据权利要求1至8中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述还包括微囊藻毒素-LR标准品溶液、显色剂、终止液、洗涤液和底物溶液。

10、权利要求1至9中任一所述的试剂盒在微囊藻毒素-LR检测中的应用。