[发明专利]木香烃内酯的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物有效成分提取分离制备领域，具体涉及一种从广玉兰叶中提提取分离木香烃内酯的方法。

背景技术

木香烃内酯(costunolide)为一类倍半萜烯内酯化合物，分子中含有一α-亚甲基-γ-内酯基团，具有抗菌抗病毒样作用。文献(Song XK，Tu PF，et al.A newsesquiterpene lactone from Tsoongiodendron odorum Chun.J Asian Nat Prod Res.2001：3(4)：285-291)报道，木香烃内酯显示对白血病癌细胞系(HL-60)具有细胞毒性作用，能抑制白血病癌细胞的生长。文献(Koo TH，Lee JH，et al.A sesquiterpenelactone，costunolide，from Magnolia grandiflora inhibits NF-kappa B by targeting Ikappa B phosphorylation.Planta Med，2001 Mar，67(2)：103-107)记载，木香烃内酯具有抑制核转录因子NF-kB作用，实验证明，其能抑制NF-kB与DNA结合，并呈剂量依赖关系，作用强于小白菊内酯，还可抑制由脂多糖(LPS)诱导的iNOS的mRNA的表达，在浓度为1ug/ml 时；即可达到完全抑制作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从广玉兰叶中提取分离木香烃内酯的方法，本发明方法适合工业化生产，得率高，产物纯度可达90％以上。

本发明以广玉兰叶为原料，以水浸泡提取除去其中的水溶性成分后，再用浓度较高的能与水混溶的有机溶剂系统提取，经柱层析分离精制后可得到木香烃内酯。

实现本发明的具体工艺如下：

a)水提取弃杂：广玉兰叶粗粉，以去离子水浸泡提取两次，每次12小时，过滤，弃水提取液，残渣备用；

b)木香烃内酯粗提物的制备：经水提取后的广玉兰叶，用能与水混溶的有机溶剂提取，减压浓缩提取液，浓缩液中再加入蒸馏水分散，用石油醚或己烷萃取至萃取液颜色变淡，再改用氯仿或乙酸乙酯萃取，合并氯仿或乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得木香烃内酯粗提物；

c)木香烃内酯的精制：将上述得到的木香烃内酯粗提物，采用硅胶柱进行进一步的分离，以石油醚-乙酸乙酯20∶1-4∶1或石油醚-丙酮20∶1-4∶1为流动相梯度洗脱，收集含木香烃内酯的流份段，浓缩。

d)将第一次收集得到的木香烃内酯再次采用硅胶柱层析分离，以石油醚-乙酸乙酯5∶1等度洗脱，收集木香烃内酯流份，浓缩、干燥即得。

其中所用的能与水混溶的有机溶剂系统可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮以及这些溶剂的任意组合，优选乙醇，更优选75％～95％的乙醇。

本发明中的提取方法可以是浸泡提取、渗漉提取或回流提取，优选回流提取。

本发明在第一次收集木香烃内酯时，当所得木香烃内酯大于或等于90％时，可以不需第二步硅胶柱层析精制，对木香烃内酯纯度小于90％的流份，采用第二步硅胶柱层析进一步精制。

本发明在采用硅胶柱层析分离时，所用的流动相除为石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮外，还可用己烷-丙酮、己烷-乙酸乙酯、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇系统，只要在分离过程中，能将木香烃内酯与其它成分分开即可，可认为与本发明技术方案等同。

本发明所得到的木香烃内酯，加入药学上可接受的辅料，可制成各种所需的剂型，优选为口服剂型，如片剂、胶囊剂、滴丸等。

具体实施例

木香烃粗内酯的制备

实施例1

广玉兰叶500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取两次，每次12小时，过滤，弃水提液，残渣用8倍量75％的乙醇回流提取两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至浸膏状，再加入小于20％的乙醇分散浸膏，石油醚萃取分散液，至萃取液颜色变淡，减压除去残留石油醚，改用乙酸乙酯萃取至乙酸乙酯萃取液颜色变淡，合并乙酸乙酯萃取液，减压浓缩、干燥即得。

实施例2

广玉兰叶500g，粉碎成粗粉，8倍量水浸泡提取两次，每次12小时，过滤，弃水提液，残渣用8倍量95％的乙醇回流提取两次，每次1.5小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至浸膏状，再加入小于20％的乙醇分散浸膏，己烷萃取分散液，至萃取液颜色变淡，减压除去残留己烷，改用氯仿萃取至氯仿萃取液颜色变淡，合并氯仿萃取液，减压浓缩、干燥即得。