[发明专利]一种提取罗希吐碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取罗希吐碱(rohitukine)的方法，特别是一种从红果樫木树皮中提取罗希吐碱的方法。

背景技术

红果樫木Dysoxylum binectariferum(Roxb.)Hook.f.ex Bedd为楝科樫木属植物，在我国分布于海南及云南南部等地区，至今未见药用报道。红果樫木的树皮中含有生物碱类成分，以罗希吐碱为主，含量约为0.9％。罗希吐碱具有抗炎和免疫调节的生物活性。

发明内容

本发明的目的是提供一种从红果樫木中提取罗希吐碱的方法。

本发明提供的提取罗希吐碱的方法，包括以下步骤：

1)将红果樫木树皮粉末溶解于提取溶剂后，回流或超声提取，得到红果樫木的粗提物；所述提取溶剂为水、质量浓度为10％-100％的乙醇或质量浓度为10％-100％的甲醇。

2)将红果樫木的粗提物溶解于水中，调节该粗提物的水溶液呈酸性，用水饱和的正丁醇或乙酸乙酯进行萃取；保留水层的萃取液，并将其调节为碱性；用水饱和的正丁醇再进行萃取，收集正丁醇层萃取液，回收溶剂至干，得到含有罗希吐碱的提取物；

3)将含有罗希吐碱提取物水溶液的pH值调节到1-2，用阳离子交换树脂进行离子交换，用水洗脱至流出液的pH值呈中性，再用碱性的30％-90％乙醇溶液洗脱，收集乙醇溶液的洗脱液，回收溶剂至干，得到含有罗希吐碱的洗脱物。

上述提取方法的步骤1)中，所述红果樫木树皮粉末40目-120目。

上述提取方法的步骤1)中，所述乙醇或甲醇水溶液的浓度为70％，所述乙醇或甲醇水溶液的质量为所述红果樫木树皮粉末质量的10-50倍，优选为50倍。

上述提取方法的步骤1)中，所述回流提取的时间为1-12小时，所述超声提取的时间为15-60分钟，优选为60分钟。

上述提取方法的步骤2)中，调节红果樫木提取物溶液的目标pH值为1-2；用氨水调节水层溶液的目标pH值为10-11。

上述提取方法的步骤3)中，用0.5M的盐酸溶液将所述罗希吐碱提取物的水溶液的pH值调节到1-2；所述阳离子交换树脂为732型阳离子交换树脂、DOWEX 50WX2型阳离子交换树脂、D-72阳离子交换树脂、D001阳离子交换树脂等；所述碱性的30％-90％乙醇溶液的目标pH值为10。

上述提取方法的步骤3)中，用质量浓度为25％的氨水将所述30％-90％乙醇溶液的pH值调节到10。

本发明所提供的提取工艺操作简单，酸碱用量少，生产成本较低，罗希吐碱的提取效率较高，最终红果樫木树皮的提取物中罗希吐碱的含量大于50％，且该提取物具有抗炎和免疫调节的生物活性，药用治疗价值很高，非常适宜于工业化生产。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

下述实施例中，利用高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，简称HPLC)对该红果樫木的提取物进行检测。选用Zorbax SB-C18柱或各种型号ODS柱(4.6mm×250mm，5μm)的色谱柱，柱温为25℃，检测波长为254nm；选用20mM磷酸二氢钾(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱，该流动相的流速为1.0mL/min；罗希吐碱的HPLC保留时间为26-27min。

实施例1、提取罗希吐碱

本发明所述提取罗希吐碱的方法主要包括以下步骤：

1)将红果樫木树皮的粉末过40目筛后，称取50g，用50倍该粉末质量的70％乙醇溶液浸泡30分钟，超声提取60分钟，将提取后的药渣用同样的方法再提取一次。

利用HPLC测得前后两次超声提取液中罗希吐碱的峰面积比值为13.06，第一次提取液中罗希吐碱的含量为0.95％。

取上述提取液回收溶剂到没有乙醇，水定容到500mL，得到该红果樫木的粗提物。

2)取上述粗提物250mL，加入0.5M盐酸将pH值调节为2，用水饱和的正丁醇萃取一次，弃去正丁醇层萃取液；保留水层的萃取液，加入25％的氨水将pH值调节到10，用250mL水饱和的正丁醇萃取，收集正丁醇层萃取液，定容到300mL；

取50mL正丁醇萃取液，回收溶剂后充分干燥，称重，甲醇溶解定容到10mL，利用HPLC测定该正丁醇层萃取液中罗希吐碱的含量，如表1中编号1-1样品所示。

3)另取步骤2)得到的正丁醇层萃取液150mL，回收溶剂，充分干燥，用100mL水溶解，用0.5M的盐酸将pH值调节到2，得到酸化的提取物；