[发明专利]一种HPLC法分析分离氯吡格雷中间体及其对映异构体的方法

说明书

技术领域

本发明属涉及一种高效液相色谱法，尤其是一种分析分离氯吡格雷中间体及 其对映异构体的高效液相色谱法。

背景技术

氯吡格雷为一种抗凝血药，在其制备过程中的一种中间体的结构式为

分子式为C₁₆H₁₆CINO₂S，化学名为(S)-α-(2-氯苯基)-6，7-二氢噻吩并[3，2-c]-吡啶 -5(4H)-乙酸甲酯，该中间体的分子中含1个手性碳原子，在通过定向合成目标化 合物氯吡格雷的过程中需要控制其对映异构体的含量。

对于氯吡格雷中间体的对映异构体杂质，在药物合成过程当中是需要进行质 量控制的。含手性碳原子的对映异构体的分离一直是手性药物合成和制剂过程中 质量控制的难点，实现氯吡格雷中间体及其对应异构体的分离在氯吡格雷药物的 合成和制剂过程的质量控制方面具有现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析分离氯吡格雷中间体及其对映异构体杂质 的高效液相色谱方法，从而实现氯吡格雷中间体与其对映异构体杂质的分离测 定。

申请人发现，以纤维素类手性柱，以乙腈与pH值为2-4的磷酸/磷酸盐缓冲 液的混合溶液为流动相，可以将氯吡格雷中间体及其对映异构体进行有效分离， 从而可以准确控制氯吡格雷的质量。本发明的方法能简单、快速、准确地分析分 离氯吡格雷中间体及其对映异构体杂质。

进一步地，选用OD-RH(DACEL150mm×4.6mm)纤维素类手性柱，可以 获得更好的分析分离效果。OD-RH纤维素类手性柱是以(纤维素三(3，5-二甲苯 基氨基甲酸酯))为填料。

进一步地，本发明的磷酸/磷酸盐缓冲液中的磷酸盐选自磷酸二氢铵或磷酸 二氢钠，最优选磷酸二氢铵。

本发明的方法中的流动相选用体积比为25∶75乙腈与磷酸/磷酸盐缓冲液的 混合溶液。

本发明的方法中的流动相中磷酸/磷酸盐缓冲液的pH值为2.5。

本发明所述的分析分离方法，可按照以下方法实现：

(1)取氯吡格雷中间体样品适量，用甲醇或异丙醇溶解样品，配制成每1mL 含氯吡格雷0.1mg～0.5mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.4～1.2mL/min，检测波长为205～235nm，最佳检 测波长为225nm，色谱柱柱温箱为20～40℃，色谱柱柱温的最佳温度为室 温。

(3)取(1)的样品溶液2-50μL注入液相色谱仪，完成氯吡格雷中间体及其对 映异构体的分析与分离。

其中：

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A

色谱柱：OD-RH(DACEL150mm×4.6mm)手性色谱柱

流动相∶乙腈-(0.01mol/L磷酸二氢钠，稀磷酸调pH至2.5)＝25∶75

流速：1.0mL/min

检测波长：225nm

柱温：室温

进样体积：10μL

本发明采用纤维素类OD-RH(DACEL150mm×4.6mm)手性色谱柱，能够 有效的分析分离氯吡格雷中间体及其对映异构体(杂质)；选择流动相溶解样品， 确保了溶液的稳定性；选择进样体积10μL，柱温为室温，提高了色谱峰的对称 性。本发明解决了含氯吡格雷中间体及其对映异构体的原料及制剂的分析与分离 问题，从而确保了氯吡格雷及其制剂的质量可控。

附图说明

图1实施例1，乙腈-(0.01mol/L磷酸二氢铵，磷酸调pH2.5)＝25∶75的 HPLC图；

图2实施例2，乙腈-(0.01mol/L磷酸二氢铵，磷酸调pH3.0)＝25∶75的 HPLC图

图3实施例3，乙腈-(0.01mol/L磷酸二氢铵，磷酸调pH4.0)＝25∶75的 HPLC图

图4实施例4，乙腈-(0.01mol/L磷酸二氢铵，磷酸调pH3.5)＝30∶70的 HPLC图

具体实施方式：

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A；

色谱柱：OD-RH(DACEL150mm×4.6mm)；