[发明专利]葎草花粉主要致敏蛋白的分离纯化方法有效
| 申请号： | 200710122177.9 | 申请日： | 2007-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN101392017A | 公开（公告）日： | 2009-03-25 |
| 发明（设计）人： | 尹佳;程璇 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/18;C07K4/10 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王朋飞 |
| 地址： | 100730北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 花粉 主要 蛋白 分离 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从葎草花粉中分离纯化主要致敏蛋白质的方法，包括步 骤：
1)将葎草花粉脱脂后，用PBS缓冲液提取，离心得上清，经盐 析、复溶、除盐、浓缩得葎草花粉蛋白粗提液；
2)采用Amersham的Sephacryl 100层析柱进行凝胶分子排阻层 析，其中用pH7.2的0.05M PBS上柱和洗脱，收集保留体积为 87.25±0.65ml的洗脱峰；
3)强阴离子交换层析，其中所述的强阴离子交换层析的层析柱 为Amersham的HiTrap Q Sepharose FF；
其中，将凝胶分子排阻层析的收集液经预处理后加入到平衡后的 所述强阴离子交换层析柱中，用含0～0.1M NaCl浓度梯度的pH7.0 的0.02M BisTris-HCl进行线性梯度洗柱，再用0.1M NaCl的pH7.0 的0.02M BisTris-HCl恒定洗柱，最后用0.1～0.2M NaCl的pH7.0的 0.02M BisTris-HCl洗脱，收集洗脱峰。
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