[发明专利]防己有效组分及其制备方法与用途

权利要求书

1.一组具有抗肿瘤作用的防己有效组分，其制备过程如下：

步骤1：用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对防己进行提取，

步骤2：药渣用乙醇提取，得到提取液，

步骤3：提取液经过色谱柱层析得洗脱液，

步骤4：用制备液相色谱梯度洗脱得到的洗脱液，流动相为水和乙腈，收集洗脱 液得到有效组分，

其中，步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇 ＝1-5∶1-5，

步骤2中所述药渣用乙醇提取，所述乙醇为50-90％的乙醇，

步骤3中所述经过色谱柱层析是用5％乙醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先， 采用5％乙醇作为流动相，然后改换50％乙醇作为流动相，得洗脱液，

步骤4为：用制备液相色谱继续分离得到的洗脱液，流动相为水-A和乙腈-B， 进行梯度洗脱，程序如下：

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段14.1-17.8分钟、17.8-21.0分钟、21.0-24.5分钟、24.5-27.7分钟、27.7-30.5 分钟、34.2-41.0分钟、41.0-45.0分钟收集溶液，不同时间段的溶液分别浓缩干 燥后得到相对应的有效组分，防己B03，防己B04，防己B05，防己B06，防己 B07，防己B09，防己B10。

2.权利要求1的有效组分，其特征在于，步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合 物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇＝1-2∶1-2。

3.权利要求1的有效组分，其特征在于，步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合 物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1。

4.含有权利要求1-3任何一项有效组分的药物组合物。

5.权利要求1的有效组分的制备方法，其特征在于，其制备过程如下：

步骤1：用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对防己进行提取，

步骤2：药渣用乙醇提取，得到提取液，

步骤3：提取液经过色谱柱层析得洗脱液，

步骤4：用制备液相色谱梯度洗脱得到的洗脱液，流动相为水和乙腈，收集洗脱 液得到有效组分，

其中，步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇 ＝1-5∶1-5，

步骤2中所述药渣用乙醇提取，所述乙醇为50-90％的乙醇，

步骤3中所述经过色谱柱层析是用5％乙醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先， 采用5％乙醇作为流动相，然后改换50％乙醇作为流动相，得洗脱液，

步骤4为：用制备液相色谱继续分离得到的洗脱液，流动相为水-A和乙腈-B， 进行梯度洗脱，程序如下：

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段14.1-17.8分钟、17.8-21.0分钟、21.0-24.5分钟、24.5-27.7分钟、27.7-30.5 分钟、34.2-41.0分钟、41.0-45.0分钟收集溶液，不同时间段的溶液分别浓缩干 燥后得到相对应的有效组分，防己B03，防己B04，防己B05，防己B06，防己 B07，防己B09，防己B10。

6.权利要求5的有效组分的制备方法，其特征在于，步骤如下：

防己粉碎，加入8倍量乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1，加热回流1小时，提取2次，药 渣加入8倍量70％乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液，将提取 液浓缩后，用5％甲醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先，采用5％甲醇作为流动 相，然后改换60％甲醇作为流动相，得洗脱液，用制备液相色谱继续分离洗脱 液，分离条件：色谱柱为Agilent制备柱Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm，流动 相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离， 在时间段14.1-17.8分钟、17.8-21.0分钟、21.0-24.5分钟、24.5-27.7分钟、27.7-30.5 分钟、34.2-41.0分钟、41.0-45.0分钟收集溶液，不同时间段的溶液分别浓缩干 燥后得到相对应的有效组分，防己B03，防己B04，防己B05，防己B06，防己 B07，防己B09，防己B10。