[发明专利]促红细胞生成素的应用

说明书

本申请为申请日为2003年7月25日，申请号为03822116.0(国际申请号为PCT/EP03/08229)，发明名称为“促红细胞生成素的应用”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及到促红细胞生成素的应用，该物质用于刺激内皮祖细胞的生理动员、增殖和分化；用于刺激血管发生；用于治疗与内皮祖细胞机能障碍有关的疾病；以及用于生产治疗这种疾病的药物组合物，和生产包含促红细胞生成素和其它合适的能刺激内皮祖细胞的活性成分的药物组合物。

背景技术

血管内皮是排列衬于血管内壁的一层细胞。内皮将血和其它血管层隔开，但内皮不仅仅是被动的血管屏障，而是还能积极调节血管紧缩状态。因此，在此还提及内皮依赖的血管舒张。由于内皮的位置关系，内皮始终承受血液动力学及新陈代谢的应激反应。因此，一些病理状态，如血压升高、LDL值升高、肾功能受损，或者血糖升高，通常与内皮的功能缺陷有关，从而产生形态上的损坏，例如出现动脉粥样硬化等类似疾病。内皮功能发生变化、降低或者内皮功能障碍的早期征兆是内皮依赖的血管舒张减少。

在患冠心病时，或者即使不患冠心病但存在风险因素时，比如说患有高血压、高脂蛋白血症或者糖尿病，内皮功能缺陷表现在NO(＝EDRF)的生成减少，和内皮素(Endothelin)生成增加。高的内皮素血浆水平会导致异常的细胞粘附、炎症、血管增生及严重的血管狭窄。内皮功能障碍的另一个特征是：类似于ICAM-1以及VCAM-1的粘附分子的过度生成，造成血小板及单核细胞大量地附着在内皮上，从而加重了血管的紧缩状态。由此，各个系统发生失衡，从而促进了血管收缩、粘附、聚集、血液凝固、动脉粥样硬化，并进一步促使动脉血栓形成。甚至心理应激也会导致可测量的内皮机能障碍，这种障碍可以持续至4小时。

内皮细胞同样参与新血管形成。血管的形成对许多过程，如胚胎形成、妇女的生殖周期、伤口愈合、肿瘤生长以及局部缺血的区域新血管形成过程，具有重要意义。最初，出生后血管的形成，主要归因于血管新生的过程。血管新生(angiogenesis)，是指通过毛细血管从已经存在的血管系统中芽生出新的血管。在血管新生过程中，首先是包围血管的基膜通过蛋白水解酶被分解，并且在血管周围区域内的细胞外基质裂解。在此过程中，由此释放出来的血管新生刺激物质会使早已存在的已分化的内皮细胞沿着趋化刺激物移行，与此同时，这种内皮细胞进行增殖和变形转化。而后，通过内皮细胞的相邻沉积，形成毛细血管状腔的新的血管袢。然后，就开始新的基膜的合成。

但最近的研究表明，在成年机体中新血管的形成不仅基于血管新生，而且基于血管发生机制。血管发生(vasculogenesis)是指由不同分化位点的内皮祖细胞形成的新血管。新发现在健康人和动物的外周血中存在内皮祖细胞(EPC)，这对血管发生局限于胚胎发育期这一教条进行了有力批驳。应用动物模型可以证明，源自骨髓的内皮祖细胞积极参与新血管形成。其也表明，能表达内皮特异性抗原的、特异性的CD34阳性的白细胞亚群，可以移植生长于局部缺血区域。除此以外，在体外从CD133⁺和CD34⁺细胞中可以提取出内皮祖细胞(EPC)，该内皮祖细胞对成年机体中的血管形成做出了显著贡献(Asahara et al.，Science，275(1997)，964-967；Crosby et al.，Circ.Res.，87(2000)，728-730；Gehling et al.，Blood，95(2000)，3106-3112)。另外还有证据表明，注射分离的CD34⁺细胞或者培植的内皮祖细胞，可以促进糖尿病老鼠的血流恢复(Schattmann et al.，J.Clin.Invest.，106(2000)，571-578)，并且增进体内新血管形成(Asahara et al.，Circ.Res.，85(1999)，221-228；Crosby et al.，Circ.Res.，87(2000)，728-730；Murohara et al.，J.Clin.Invest.，105(2000年)，1527-1536)。除此以外，也有证据表明，通过CD34⁺细胞诱导的新血管形成改善了心脏功能(Kocher et al.，Nat.Med.，7(2001)，430-436)。