[发明专利]联苯菊酯抗原、抗体及其应用无效
申请号: | 200710133285.6 | 申请日: | 2007-10-16 |
公开(公告)号: | CN101135683A | 公开(公告)日: | 2008-03-05 |
发明(设计)人: | 王鸣华;施海燕;李波 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;C07C69/40;C07C63/331 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 张素卿 |
地址: | 210095江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 联苯 抗原 抗体 及其 应用 | ||
1.联苯菊酯人工半抗原,其特征在于它的分子结构式为:
或
2-甲基-3-苯基苄基丁二酸酯LBc 2-甲基-3-苯基苯甲酸LBy。
2.权利要求1所述联苯菊酯人工半抗原的制备方法,其特征在于,
人工半抗原2-甲基-3-苯基苄基丁二酸酯LBc的制备步骤如下:
1)取0.5~5g联苯醇于100mL三口烧瓶中,加入5~15mL无水吡啶,0.3~3g丁二酸酐,40~50℃避光磁力搅拌反应10~12h;
2)反应后的混合液在3.6%盐酸和乙酸乙酯间进行分配,取乙酸乙酯层;
3)乙酸乙酯层再用水洗,上层过无水Na2SO4,浓缩近干;
4)柱层析法纯化,石油醚湿法装柱,收集洗脱液为95∶5的氯仿∶甲醇洗脱相,浓缩近干得LBc白色晶体;
人工半抗原2-甲基-3-苯基苯甲酸LBy的制备步骤如下:
1)取0.2~2g联苯醇于100mL三口烧瓶中,加入0.5~1g 18-冠醚-6,加入15~30mL丙酮溶解,在冰浴条件下,将2.8g高锰酸钾研细后的粉末分批加入,搅拌反应5h,
2)将反应后的混合物抽滤,用少量丙酮洗滤饼,滤饼风干后,放入研钵内,加入适量的饱和NaHCO3,研磨,过滤除去MnO2,
3)滤液用浓盐酸酸化,乙醚萃取,水洗,有机相过无水Na2SO4,浓缩近干,
4)柱层析法纯化,收集洗脱液为氯仿的洗脱相,浓缩得LBy白色晶体。
3.一种联苯菊酯抗原,其特征在于,分别由权利要求1或2所述的半抗原2-甲基-3-苯基苄基丁二酸酯LBc与蛋白质偶联、2-甲基-3-苯基苯甲酸Lby与蛋白质偶联而成,其分子结构式为:
免疫原LBc-BSA 包被抗原LBy-OVA
4.用权利要求3所述联苯菊酯抗原制备的联苯菊酯特异性抗体。
5.权利要求4所述联苯菊酯特异性抗体在检测食品、农产品和环境样品中联苯菊酯的残留量中的应用。
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