[发明专利]人膜协同因子蛋白小基因pMCP的构建方法

权利要求书

1.人膜协同因子蛋白小基因pMCP的构建方法，其特征在于首先以人血细胞基因组DNA为模板，采用PCR方法，克隆人膜协同因子蛋白基因的启动子；以pSG5-MCP为模板扩增人膜协同因子蛋白cDNA；然后采用重叠PCR方法将MCP启动子和cDNA拼接起来，用获得的DNA片段替换出pcDNA3.1中的CMV启动子，构建成人膜协同因子蛋白小基因pMCP。

2.根据权利要求1所述人膜协同因子蛋白小基因pMCP的构建方法，其特征在于克隆人膜协同因子蛋白基因的启动子时，以人血细胞基因组DNA为模板，扩增的上、下游引物序列为：

5′-GCACGCGTGGTAACTGCCAGAAATTCTTTA-3′和5′-GTACAGCAGCAACACCATGG-3′，上游引物5′端引入MluI酶切位点。

3.根据权利要求1或2所述人膜协同因子蛋白小基因pMCP的构建方法，其特征在于克隆人膜协同因子蛋白cDNA时，以pSG5-MCP为模板进行扩增，扩增的上、下游引物序列分别为：5′-GGAGAAATAACAGCGTCTTCC-3′和5′-CGGGTACCGCAATATTAGCTAAGCCACAGT-3′，下游引物5′端引入Kpn I酶切位点。