[发明专利]一种水母毒素提取物及其制备方法与用途无效
申请号: | 200710135360.2 | 申请日: | 2007-11-07 |
公开(公告)号: | CN101181305A | 公开(公告)日: | 2008-05-21 |
发明(设计)人: | 李联泰;高健;安贤惠 | 申请(专利权)人: | 淮海工学院 |
主分类号: | A61K35/56 | 分类号: | A61K35/56;A61P25/04;A61P29/00;A61P31/00 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 | 代理人: | 刘喜莲 |
地址: | 222006江苏省连云*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水母 毒素 提取物 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种水母毒素提取物,其特征在于,它是从水母触手中分离得到的多肽混合物,其制备方法如下:
(1)冻干粉制备:以水母触手为原料,将其分割成块,组织匀浆,离心去除沉淀,再真空冷冻干燥,得冻干粉备用;
(2)葡聚糖凝胶G-10脱盐柱脱盐:将冻干粉溶于纯净水后上样于G-10葡聚糖凝胶过滤柱,用Tris-HCl pH 7.8缓冲液洗脱,当测得A280小于0.03时停止洗脱;将按上述方法收集的脱盐后样液装入离心管,封口并做好标记放进-20℃冰箱中冷藏备用;
(3)SP Sephadex C-25离子交换柱层析:采用Biologic Duoflow蛋白质层析系统,利用含0.8mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液进行梯度洗脱,收集第五峰分离物;
(4)对第五峰分离物再进行SP Sephadex C-25离子交换柱层析,方法同步骤(3),收集第六峰分离物,即得。
2.根据权利要求1所述的水母毒素提取物,其特征在于,步骤(1)所述的冻干粉制备的方法如下:将水母触手剪成小块,加入适量磷酸盐缓冲液,用高速组织捣碎机进行组织匀浆,收集匀浆液;高速冷冻离心取出上清液;将上清液倒平板后保鲜膜封存于-40℃冰柜冷冻,然后再放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥成冻干粉,装入离心管中于-20℃冰柜中保存备用。
3.根据权利要求2所述的水母毒素提取物,其特征在于,所加入的磷酸盐缓冲液为0.1M,pH为6.0。
4.根据权利要求2所述的水母毒素提取物,其特征在于,高速冷冻离心20min,10000r/min,4℃。
5.根据权利要求1所述的水母毒素提取物,其特征在于,在步骤(3)中所述的Tris-HCl缓冲液的浓度为0.05mol/L,pH为7.8。
6.根据权利要求1-5中任何一项所述的水母毒素提取物,其特征在于,所述的原料水母触手为海蛰触手。
7.一种如权利要求1所述的水母毒素提取物的制备方法,其特征在于,它采用了如权利要求1中所述的步骤(1)-(4)进行制备。
8.一种如权利要求1所述的水母毒素提取物作为制备抑制疼痛及抗微生物感染治疗的药物的应用。
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