[发明专利]抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗生素药物含量测定方法，尤其是指一种抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量的方法。

背景技术

呋布西林钠为氨基青霉素的脲基衍生物，是广谱半合成青霉素，有较强的抗菌活性，对流感嗜血杆菌、奇异变形杆菌、伤寒沙霉菌、部分大肠埃希菌和铜绿假单胞菌等革兰氏阴性菌有良好的抗菌作用，临床上主要用于绿脓杆菌引起的感染。目前，原料药及其制剂为卫生部药品标准抗生素药品第一册1989年版所收载，标准编号为WS1-C2-0021-89，其含量测定方法为剩余酸碱滴定法，但用抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量的方法还未见有申请行政保护的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种准确、可靠、灵敏度高的抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量的方法。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案是：

抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量的方法，其化学分子式为

其特征在于该测定方法如下：

(1)实验材料：采用《中国药典》2005年版二部抗生素微生物检定法之管碟法，检定菌为中国药品生物制品检定所公开出售的金黄色葡萄球菌，CMCC(B)26003，菌液浓度为1.0％～1.5％；培养基采用《中国药典》2005年版二部规定的由中国药品生物制品检定所公开出售的II号pH6.0～6.2抗生素检定用培养基，灭菌缓冲液为pH6.0的磷酸盐缓冲液，其配制方法为：取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml，滤过，在115℃灭菌30分钟，备用；

(2)标准品溶液的制备：精密称取呋布西林钠标准品55.4μg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，制成每1ml含呋布西林钠1000ug的溶液，分别取此溶液1.0ml，置100ml容量瓶中加灭菌缓冲液稀释至刻度作为标准品高剂量溶液；置200ml容量瓶中加灭菌缓冲液稀释至刻度作为标准品低剂量溶液；

(3)供试品溶液的制备：精密称取呋布西林钠样品55.6g，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，制成每1ml含呋布西林钠1000ug的溶液，分别取此溶液1.0ml置100ml容量瓶中加灭菌缓冲液稀释至刻度作为供试品高剂量溶液；置200ml容量瓶中加灭菌缓冲液稀释至刻度作为供试品低剂量溶液；

(4)操作方法：每个供试液取平底双碟10块，分别注入加热融化的培养基20ml，使在碟底内均匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层；另取培养基100ml，加热融化后，放冷至40℃，加入金黄色葡萄球菌菌液，摇匀，在每一双碟中分别加入5ml，使在底层上均匀摊布，作为菌层，放置水平台上冷却后，在每一双碟中以等距离均匀安置不锈钢小管4个，用陶瓦盖覆盖备用；在每一双碟中对角的2个不锈钢小管中，分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中分别滴装高、低两种浓度的供试品溶液，37℃培养15～18小时后，取出；

(5)在抑菌圈电脑测量分析仪上测量并计算结果即得呋布西林钠及其制剂的含量。

采用上述技术方案本发明取得的有益效果是：抗生素微生物检定法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较标准品和对照品两者对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小，以测定供试品活性的一种方法，试验结果能真实反映出供试品的体外抗菌活性，有关生产企业可根据试验结果优选出最佳的合成生产工艺，因此，抗生素微生物检定法对有关生产企业进一步改进生产工艺，提高药品质量具有不可替代的指导作用。采用抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量不但试验方法准确、有效、成本低廉，而且试验结果能真实反映出呋布西林钠及其制剂的抗菌活性，该方法在该药品及其制剂的生产和质量控制中具有较强的实用性和操作性。

具体实施方式

抗生素微生物检定法测定呋布西林钠及其制剂的含量的方法，其化学分子式为

该测定方法如下：

(1)实验材料：采用《中国药典》2005年版二部抗生素微生物检定法之管碟法，检定菌为中国药品生物制品检定所公开出售的金黄色葡萄球菌，CMCC(B)26003，菌液浓度为1.0％～1.5％；培养基采用《中国药典》2005年版二部规定的由中国药品生物制品检定所公开出售的II号pH6.0～6.2抗生素检定用培养基，灭菌缓冲液为pH6.0的磷酸盐缓冲液，其配制方法为：取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml，滤过，在115℃灭菌30分钟，备用；