[发明专利]热敏性共混物及其应用

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求享受于2006年6月12所提交的题为“热敏性共混物及其应用” 的第06300583.9号欧洲专利申请的权利，并采取引用的方式将其结合在本申请 中。

背景技术

细胞生长的体内增殖和分化能力具有大量的应用。体内细胞生长发生在胞 外基质中(ECM)，其是一个三维环境。例如，诸如培养皿表面之类的二维表面 不能代表细胞在体内的生长情况。三维环境的一个功能是通过细胞基质和细胞 与细胞之间的联系来方便地感知环境并对环境作出反应从而引导诸如迁移、增 殖、异化、表型的维持以及凋亡。因此，期望把具有适当的多孔、大表面积以 及孔与孔之间具有良好连接的材料用于细胞培养。尤其是为了实现与体内细胞 生长具有可比性的有效的细胞培养，希望该材料可以允许细胞透过整个材料。

细胞培养一般通过在生物介质的存在情况下将细胞种植在培养基上来实 现。在附着和增殖之后，培养好的细胞一般可以采用侵入性的方法来采集，例 如机械刮擦法、超声法、化学或酶处理法，及其它们的组合方法。机械刮擦法 会损伤细胞，并且在诸如小直径孔、多层或其它3维基质等受限制的空间中不 方便使用。化学(例如EDTA)或生物(例如胰蛋白酶)处理法会伤害细胞并 存在引入杂质的风险。例如，众所周知，胰蛋白酶会损害细胞功能。更甚地， 采用这些方法来收获一些附着比较牢固的细胞是困难的，而且需要经历长时间、 损害性的暴露。

因此，需要一种可以容易地、非侵入性并且有效地从培养基中采集活细胞 的方法。由于其可以使操作、添加剂以及污染达到最小化，并允许完好无损地 采集细胞以及有效地回收细胞及其产物，尤其是膜结合产物，非侵入性、非破 坏性的采集细胞培养物的替换方法将会一个明显的进步。本文所描述的是便于 细胞和组织固定及其随后生长的基质。此外，本申请所描述的基质可以方便地 释放和分离培养在其中的细胞和组织。

发明内容

根据所公开的材料、化合物、组合物、制品、装置和方法的目的，本申请 例举并主要描述了热敏性共混物(thermo-responsive blend)。本申请也对由该热敏 性共混物组成并用于固定细胞或组织的基质、制品和试剂盒以及它们的使用方 法作了描述。其它优点的一部分在以下说明书中描述，一部分从所述说明书将 显而易见，或者可以从下述各个方面的实施中学习得到。以下所述的优点可以 通过所附权利要求书中特别指出的要素和组合实现并获得。应当理解，前述一 般性描述和下列具体描述仅仅是例举的和解释性的，而非限制性的。

附图说明

附图结合在说明书中并构成了说明书的一部分，其阐述了下述几个方面。

图1显示了45℃和20℃下聚苯乙烯/聚(N-异丙基丙烯酰胺)的共混物的水接 触角，其中聚(N-异丙基丙烯酰胺)占共混物的0-25wt％。

图2显示了采用经溶液处理制成细胞培养基质的共混物，通过在2小时内 将温度连续降低至4℃并在胰蛋白酶中暴露10分钟的CHO细胞的数量。

图3显示了采用经挤压/热压制成细胞培养基质的共混物，通过在2小时 内将温度连续降低至4℃并在胰蛋白酶中暴露10分钟的CHO细胞的数量。

图4显示了在两个不同温度下，通过蒸发苯甲醚中的溶液而制备得到的由 PS+PPO-PEO-PS共混物所构成的厚膜的水接触角。

图5显示了在两个不同温度下，通过挤压或热压所制备的由PS+PPO- PEO-PS共混物所构成的盘的水接触角。

图6为SEM图(放大500倍)，其显示了由5wt％的聚(N-异丙基丙烯酰 胺)和95wt％PMMA所形成的纤维状材料的形态。

图7为SEM图(放大800倍)，其显示了用5wt％的聚N-异丙基丙烯酰胺) 与95wt％PMMA所形成的纤维状材料的形态。

具体实施方式

通过参考以下对所披露主题的特定方面以及所包括实施例的具体描述并参 考附图，可以更容易地理解本文所述的材料、化合物、组合物、制品，装置以 及方法。