[发明专利]一种嗜硫性磁性复合微球的制备方法和用此复合微球分离免疫球蛋白G的方法

权利要求书

1、本发明提供了一种嗜硫性复合微球的制备方法：其特征在于：

1)在FeCl₃和FeCl₂反应溶液，90℃时加入氨水，再加入酒石酸钠或油酸作为表面活性剂，得到粒径小于20nm的Fe₃O₄；

2)加入二乙烯基苯单体对Fe₃O₄分子进行包裹，再加入乙酸乙烯酯单体进行二次包裹，然后在60℃下聚合44h；

3)将得到的磁球用Na₂SO₄破乳、在磁场作用下实现分离；

4)将分离得到的磁球进行醇解反应，向磁球加入HCl溶液酸化24h；

5)把二乙烯基砜NaOH溶液加入上述磁球的Na₂CO₃溶液中进行砜化反应；

6)取已砜化纳米磁球，在NaOH溶液中加入含硫基团反应得到；

7)抽除上清夜后，用蒸馏水反复洗涤磁球至中性后，用NdFeB永磁体分离磁球得到。

2、根据权利要求1中所述的嗜硫性复合微球的制备方法，其特征在于：

1)将FeCl₃完全溶解于水中，加入FeCl₂，90℃时加入氨水，油酸反应，全程氮气保护；冷却至室温后，用蒸馏水不断清洗至中性，用环己烷配置成磁流体；

2)将磁流体加入十六烷中，再将此溶液加入表面活性剂的水溶液中，超声波作用下，形成细乳液，通入氮气，在氮气保护下，使环己烷完全蒸发；

3)将二乙烯基苯加入十六烷中，完全溶解后，将此溶液加入0.25％表面活性剂的水溶液，超声波作用下，形成细乳液；

4)乙酸乙烯酯加入0.06％表面活性剂的水溶液溶解，超声波作用下，形成细乳液；

5)将二乙烯基苯细乳液和磁流体细乳液混合后，再加入乙酸乙烯酯细乳液，而后加入过氧化硫酸钾，60℃时引发聚合，反应44h，全程氮气保护；

6)把得到的乳液倒入烧杯中，加入4倍的水，并加入Na₂SO₄进行破乳，在磁场作用下实现分离，不断抽除上清夜，并有蒸馏水反复清洗至中性；

7)把磁球加入10％NaOH/乙醇溶液进行醇解反应后，水洗至中性，在外磁场作用下，实现磁分离，抽除清夜；

8)向磁球加入0.5M HCl溶液进行酸化24h后，磁分离，用蒸馏水清洗至中性；

9)取纳米磁球加入0.5MNa₂CO₃溶液，调pH值为11-13；另取二乙烯基砜加入1M NaOH溶液，摇动混匀，调pH值为13-14；把二乙烯基砜NaOH溶液加入上述纳米磁球Na₂CO₃溶液中反应3h，充分水洗后用0.5MNa₂CO₃溶液保护；

10)取所述分散在0.5MNa₂CO₃溶液中的已砜化纳米磁球，调pH为11.4；另取含硫分子溶于1M NaOH溶液，调pH值为13.5，加入所述已砜化纳米磁球Na₂CO₃溶液，反应24h；

11)抽除上清夜后，用蒸馏水反复洗涤磁球至中性后，用NdFeB永磁体分离磁球得到。

3、根据权利要求1、2中所述的嗜硫性复合微球制备方法，其特征在于：所述含硫分子是巯基乙醇、巯基丁醇、巯基烟酸、巯基嘧啶、巯基咪唑或巯基吡啶中的一种或几种。

4、根据权利要求1、2中所述的嗜硫性复合微球制备方法，其特征在于：所述含硫分子是巯基烟酸。

5、一种分离免疫球蛋白G的方法，其特征在于：取权利要求1中所述的嗜硫性复合微球加入磷酸盐缓冲液中，充分分散后加入血清吸附，吸附液经洗涤后加入解吸附液，在磁场作用下分离得到免疫球蛋白G。

6、根据权利要求5所述的分离免疫球蛋白G的方法，其特征在于：所述解吸附剂可以是碱金属氢氧化物水溶液或碱金属氢氧化物/氯化钠水溶液。

7、根据权利要求5、6所述的分离免疫球蛋白G的方法，其特征在于：所述解吸附液的PH值范围为12.5-13.1。

8、根据权利要求5、6所述的分离免疫球蛋白G的方法，其特征在于：所述磷酸缓冲液的PH值范围为6.0-7.0。