[发明专利]一种从木豆枝叶提取物中分离纯化木豆素和球松素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从植物中分离纯化功能性成分的一种方法，具体是从木豆枝叶乙醇提取物中分离纯化木豆素和球松素。

背景技术

木豆[Cajanus cajan(L.)Millsp.]为豆科木豆属一年生或多年生木本植物、常绿灌木。又名鸽子豆、树黄豆等，是一种民间用药。有清凉、消热、解毒、止痛止血、抑菌消炎等功效，民间用于治疗外伤、烧伤、感染、褥疮和抗菌消炎等(刘中秋等，1998；孙绍美等，1995)。此外，木豆提取物制剂在印度、巴西、古巴、墨西哥、南非等国用于治疗感冒、支气管炎、麻疹、痢疾、肝炎、皮肤病、烧伤、溃疡、肿瘤等疾病(Abbiw DK.，1990；Duke JA.et al，1994：Milliken W.，1997；Grover JK.，2002)，疗效显著。我国临床组方用于治疗股骨头坏死以及循环系统疾病(袁浩等，2004)。

现在已知的木豆中活性成分包括芹菜素、木犀草素、牡荆苷、异牡荆苷、木豆素、木豆素A、木豆素C、球松素、水杨酸、β-谷甾醇、柚皮素-4′、7-二甲醚、二十一烷、二十一烷、Cajanol和一些挥发油类成分(林励等，1999；Christopher JCet al，1982；程誌青等，1992)。

木豆中的木豆素和球松素含量较高并且活性突出。木豆素与另外两种芪类化合物组方可以抑制骨丢失，维持骨小梁结构完整；木豆素的类雌激素作用具有良好的药用开发前景(陈迪华，孙兰等，2007)。而球松素是一种具有较强活性的天然黄酮类成分(刘香等.2006)，具有抗菌(Bhamarapravati et al，2006)、抗芳香、抗增殖等活性(Jean-Christophe Le Bail，2000)，近年来的药理研究发现其对抗溃疡、抗炎、止痛、胃排空即(胃胀)等方面具有明显的生理活性(潘永峰等，2005)。尽管从天然植物中获得的木豆素和球松素的活性突出，但是到目前为止关于其生产过程的报道很少，只有中国专利(CN1666745A)“一种用于治疗骨质疏松症的药物组合物”中涉及到木豆素和球松素提取纯化方法，但提纯采用传统的技术手段，经过多次硅胶柱层析，过程漫长、目标化合物易损失，而且毒性较大的有机溶剂使用量大，不利于健康生产。此外，涉及到球松素的分离纯化均为传统的方法(周立东，1999；刘雯霞，2006)。

综上所述，在利用植物提取物分离纯化木豆素和球松素的过程中，主要的影响因素在于分离过程中普遍存在耗时长，目的化合物流失大，使得成本升高。因此，有必要寻找一种简便安全经济高效地分离纯化木豆素和球松素的方法。本发明旨在建立一种通过多种现代分离纯化技术手段相结合的方法，实现简单快速、损失少的分离纯化得到木豆素和球松素

发明内容

本发明的目的在于提供一种以木技叶的乙醇提取物为原料，通过超声波振荡絮凝技术、负压空化混悬液固萃取技术、大孔吸附树脂富集技术、正相硅胶中压柱层析分离技术及低温析晶和重结晶技术大量、快速获得木豆素和球松素单体，该方法筋单易行、目标化合物损失少。本发明的目的是通过以下方案来达到的：

木豆枝叶70～95％乙醇提取物中加入50-60℃温水超声波振荡、静止絮凝，所得到粘稠絮凝物经负压空化混悬液固萃取、人孔树脂法富集和一次正相砖胶中压柱层析后分别得到木豆素和球松素的产品，纯度大于80％，经过低温析晶和重结晶得到纯度大于95％的纯品。