[发明专利]运用环介导恒温扩增技术检测食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法

权利要求书

1.一种运用环介导恒温扩增技术检测食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，其特征在于，所使用的引物组序列如下：

引物序列一：TCCACTCAGACCCACCAA

引物序列二：ACCGTATCGGCATAACTCATCCTGATACTGCGTGACT

引物序列三：TCTTACGACCGCAGCACAT

引物序列四：TTGCTTTTTATGTGGGGCTATGGAACTAAGCGGGATGGAA

2.根据权利要求1所述的一种运用环介导恒温扩增技术检测食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，其特征在于，扩增反应体系中各组分构成比例如下：

成分                浓度        加样量

扩增体系预混合物    2×         12.5μL

引物序列一          10μmol/L   0.2μL

引物序列二          10μmol/L   1.6μL

引物序列三          10μmol/L   0.2μL

引物序列四          10μmol/L   1.6μL

DNA样品                         2μL

双蒸水                          6.9μL

总体积                          25μL

3.根据权利要求1所述的一种运用环介导恒温扩增技术检测食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，其特征在于，环介导恒温扩增程序为：

(1).61℃  1小时；

(2).80℃  10分钟。

4.根据权利要求1所述的一种运用环介导恒温扩增技术检测食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的方法，其特征在于，环介导恒温扩增产物检测方法包括：

(1).10,000×g，5分钟，室温，可在试管底部见到白色沉淀；

(2).加入显色剂，反应液呈现绿色；

(3).1.5％琼脂糖凝胶电泳，结果有阶梯状电泳条带；

选择以上三种环介导恒温扩增产物检测方法中的任意一种方法进行检测。