[发明专利]一种乙酰酯酶及其编码基因无效
申请号: | 200710151277.4 | 申请日: | 2007-09-18 |
公开(公告)号: | CN101392263A | 公开(公告)日: | 2009-03-25 |
发明(设计)人: | 王磊;刘雪倩;冯露 | 申请(专利权)人: | 天津生物芯片技术有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/16;C12N1/21 |
代理公司: | 北京连和连知识产权代理有限公司 | 代理人: | 姜兆元 |
地址: | 300457天津市经*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙酰 及其 编码 基因 | ||
1.一种编码乙酰酯酶的基因,其特征在于:所述基因具有选自于下列a)、b)或c)的核苷酸序列:
a)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;
b)由于遗传密码的简并性,不同于SEQ ID NO:1但编码的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所编码的氨基酸序列相同的核苷酸序列;
c)在严格杂交条件下与上述a)或b)中的序列杂交,并且编码具有活性的乙酰酯酶的核苷酸序列。
2.一种乙酰酯酶,其特征在于:所述乙酰酯酶具有选自于下列d)、e)或f)的氨基酸序列:
d)上述a)、b)或c)所述的核苷酸序列编码的氨基酸序列;
e)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列;
f)上述e)中缺失、替换或插入一个或多个氨基酸后的氨基酸序列,并且具有该序列的蛋白质有乙酰酯酶的活性。
3、根据权利要求2所述一种乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶的反应温度为60℃,反应pH值为7.2。
4、根据权利要求2或3所述一种乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶具有与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列至少70%的同源性,同时具有该序列的蛋白质具有乙酰酯酶的活性。
5、根据权利要求4所述一种乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶具有与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列至少90%的同源性,同时具有该序列的蛋白质具有乙酰酯酶的活性。
6、根据权利要求2或3所述一种乙酰酯酶,其特征在于,所述具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中缺失、替换、或插入的多个氨基酸序列为2-100个。
7、根据权利要求2或3所述一种乙酰酯酶,其特征在于,所述具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中缺失、替换、或插入的多个氨基酸序列为2-10个。
8、一种表达乙酰酯酶的重组质粒,其特征在于,其至少包括权利要求1所述编码乙酰酯酶的基因。
9、根据权利要求7所述的一种表达乙酰酯酶的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pET-28a(+)。
10、一种产生权利要求2或3所述的乙酰酯酶的重组菌,其特征在于,该重组菌内导入了权利要求1所述的编码乙酰酯酶的基因。
11、根据权利要求10所述的一种产生乙酰酯酶的重组菌,其特征在于,所述重组菌为大肠杆菌。
12、根据权利要求11所述的一种产生乙酰酯酶的重组菌,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21菌株。
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