[发明专利]一种千层塔提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉一种千层塔提取物及其制备方法。

背景技术

千层塔别名蛇足石杉、山芝、蛇足草，为石杉科石杉属的一种药用蕨类植物。在我国分布广泛，民间常将全草用于治疗跌打损伤、淤血肿痛、精神分裂等疾病。千层塔植物成分复杂，目前国内外研究较多的是其生物碱成分，其中的石杉碱甲是一种高效、低毒、可逆并高选择性抑制乙酰胆碱酯酶的药物，可用于治疗重症肌无力、提高学习以及改善老年人的记忆功能等。

有关千层塔植物中黄酮类物质的研究还未见报道，尤其是层塔植物中黄酮类物质与石杉碱甲配伍使用后的增效减毒作用，我们研究发现从千层塔中提取的总黄酮具有抗氧化、抗衰老以及增强机体免疫力等功能，与石杉碱甲配伍使用，具有增效减毒的作用，其突出优势是不但大大提高了石杉碱甲的安全性，而且临床疗效显著，尤其是治疗血管性痴呆效果更为显著。

发明内容

本发明的千层塔提取物，该提取物由总生物碱和总黄酮共同组成，其中总生物碱包含石杉碱甲，总黄酮包括黄酮和黄酮醇，该提取物中总生物碱的含量以重量表示为10-90％，总黄酮的含量以重量表示为10-90％。

本发明千层塔提取物其制备方法如下：

取挑选好干燥的千层塔药材，粉碎成粗粉，先用稀乙醇回流提取，提取液过滤，滤渣备用，滤液减压回收乙醇，药液继续减压浓缩至稠膏状，得粗总黄酮，粗总黄酮用去离子水溶解，过滤，用大孔吸附树脂柱层析，收集稀乙醇洗脱液，减压浓缩得稠膏状，进一步结晶或纯化得总黄酮；将乙醇提取药渣和滤渣合并干燥，加入适量盐酸浸泡使其充分膨胀后，酸解，收集酸解液，减压浓缩至稀膏状，自然冷却，用氨水调PH，静置过滤，收集滤液，滤液用氯仿萃取4-6次，每次约20-30分钟，收集氯仿萃取液，减压回收氯仿后药液继续浓缩成膏状物，减压干燥得粗总生物碱，粗总生物碱用硅胶柱层析，再用氯仿和乙醇按一定比例洗脱，收集相同成分洗脱液，减压浓缩至稠膏状，有机溶剂充分结晶，总生物碱。其中大孔吸附树脂柱为市售的各种型号包括：D101、AB-8、NKA、DM130、HZ-801、HP20、sp207、SP825等所有市售型号。

本发明千层塔提取物，可以作为活性成分与药物载体配制成药剂学上的各种制剂，该制剂包括口服、注射和局部给药。

本发明千层塔提取物，可以用于制备改善记忆，阻止和治疗老年痴呆的药物。

本发明千层塔提取物测定方法如下：

总黄酮含量测定方法：采用分光光度法测定总黄酮含量，即利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物，以芦丁为标准品在500nm处测定吸光度。

总生物碱含量测定方法：采用分光光度法测定总黄酮含量，以石杉碱甲为标准品测定吸光度。

实施例一(本发明提取物的制备方法)

取挑选好干燥的千层塔药材，粉碎成粗粉，先用药材8倍量的60％的乙醇回流提取3次，每次6小时，合并3次提取液，过滤，滤渣备用，滤液减压回收乙醇，药液继续减压浓缩至稠膏状，得粗总黄酮。

粗总黄酮用适量的去离子水溶解，静置，过滤，滤液按1：10上装有大孔树脂的层析柱，先用去离子水洗脱，再用70％的乙醇洗脱，收集70％的乙醇洗脱液，减压浓缩得稠膏状，得粗总黄酮，总黄酮进一步纯化得本发明提取物中的总黄酮。

将上述乙醇提取药渣和滤渣合并挥干，按药渣量加入10倍量的PH为3的盐酸浸泡10小时，让其充分膨胀后，在50-60℃酸解3次，每次50分钟。收集3次酸解液，减压浓缩至稀膏状，自然冷却，用氨水调PH为9-10，静置，过滤，收集滤液。滤液用等体积的氯仿萃取4-6次，每次约20-30分钟，收集氯仿萃取液，减压回收氯仿后药液继续浓缩成膏状物，减压干燥得粗总生物碱。

粗生物碱按膏药量的3-5％加200目的层析硅胶拌样，自然挥干氯仿，上柱，先用氯仿和乙醇按一定比例洗脱(TLC跟踪检验)，再用氯仿和乙醇按适当比例洗脱(TLC检验)，收集相同成分洗脱液，减压浓缩至稠膏状，加入约3倍量的丙酮搅拌混合均匀(可重复3-4次)，充分结晶，吸取上清夜，抽滤，结晶品减压干燥，得总生物碱。

实施例二(本发明提取物的临床疗效观察)