[发明专利]固定化黑芥子酶及其制备方法

权利要求书

1.固定化黑芥子酶，其特征在于：从十字花科蔬菜种子或植株中分离获取黑芥子酶，制成2mm～3mm的海藻酸钙凝胶珠，硬化后用戊二醛交联。

2.如权利要求1所述固定化黑芥子酶的制备方法，其特征在于以下步骤：

(1)按每克十字花科蔬菜种子粉末加3毫升pH为6.0的磷酸缓冲液计加入磷酸缓冲液，搅拌过滤除杂后，再4℃低温离心去杂质，获黑芥子酶液；所述磷酸缓冲液中含5％体积份的甘油，1mM EDTA，3mM DTT；

(2)按体积/重量比计在上述酶液中加80％硫酸铵，4℃低温静置2小时后，在4℃条件下离心，获得酶沉淀，4℃下蒸馏水透析2小时，获得液体酶；

(3)在液体酶中加入海藻酸钠，添加量为每100毫升酶液加入3.5～4.5毫克海藻酸钠，35℃～45℃水浴溶解海藻酸钠，将混合液呈小滴状滴加到2％～3％氯化钙水溶液中，形成直径2mm～3mm的海藻酸钙凝胶珠；

(4)将海藻酸钙凝胶珠在3℃～5℃静置硬化2小时，用蒸馏水洗涤后，取颗粒加入到0.15％～0.3％的戊二醛溶液交联4小时，再用蒸馏水洗涤，得到固定化黑芥子酶颗粒，在3℃～5℃密封保存。

3.如权利要求2所述固定化黑芥子酶的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述十字花科蔬菜种子选用的是西兰花种子。