[发明专利]一种利用大孔吸附树脂制备积雪草总皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用大孔吸附树脂制备积雪草总皂苷的方法。

背景技术

积雪草【Centella asiatica(L.)Urban】为伞形科积雪草属植物，蔓生，又名胡薄荷、地钱草、崩大碗、缺碗草、马蹄草、落得打、十八缺等，在许多国家和地区传统医药领域中的应用有悠久的历史，我国中医中药对积雪草的内服和外用已有两千年的历史。积雪草味苦、辛，性寒，无毒，归肝、脾、肾、胃经。古药典记载主要用于治疗湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌打损伤等病症。现代药理学研究和应用表明，积雪草可用于治疗抑郁症、皮肤创伤、胃溃疡、传染性肝炎、皮肤病和流行性脑脊髓膜炎等。

积雪草的药理作用同它的化学成分是密不可分的。积雪草的化学成分十分复杂，其主要成分有三萜类、多炔烯烃类、黄酮类和挥发油类等。此外，积雪草中还含有氯原酸、内消旋肌醇、黄酮醇、脂肪酸、天胡荽碱、甾醇、蜡、叶绿素、烃类、木脂素类、糖、鞣质和多元酚类等成分。积雪草的化学成分中，三萜类皂苷是研究的最早、生物学活性研究最深入的一大类组分。积雪草总皂苷主要由积雪草苷(Aisaticoside，CAS No.：16830-15-2)、羟基积雪草苷(Madecassoside，CAS No.：34540-22-2)和积雪草苷B(Asaiticoside B，CAS No.：125265-68-1)组成，它们属于乌苏烷型的五环三萜皂苷，是积雪草药理活性的最主要成分，其结构式分别如下：

图1积雪草苷(A)、羟基积雪草苷(B)和积雪草苷B(C)的结构式研究表明，积雪草总皂苷具有抗增生、抗纤维化、抗抑郁、抗癌症、抗氧化和改善智力等功效，特别是积雪草苷对皮肤创伤、消除瘢痕、乳腺增生、抗抑郁等有明显的疗效。因此，高效地提取制备积雪草总皂苷产品对更好地利用积雪草资源具有重要的意义。

目前，从积雪草中制备总皂苷的工艺有一些文献及专利报道，但总体而言，存在工艺步骤繁琐，产物纯度低，质量控制水平低下等不足。现有技术从积雪草中制备总皂苷的步骤较为繁琐或关键技术要求较高，难以实现工业化生产或生产成本太高，而且产品得率低或产品含量不高，从而造成产品价格过高。如专利CN97117787.2所公开的方法制备时使用大量的卤化物和高级醇等难挥发的有机溶剂，不仅造成生产成本高，而且对环境造成一定的污染；专利CN200380109575.3公开的方法中，使用了阴离子交换树脂和阳离子交换树脂，中间采用选择性脱脂的步骤，工艺复杂；专利CN01113014.8所公开的方法中，使用了D101和ZTC-1两种大孔吸附树脂，但对积雪草总皂苷的吸附量小、产品回收率和含量均不高。

本发明拟利用大孔吸附树脂来制备积雪草总皂苷。大孔吸附树脂是一类不带离子交换基团的、具有大孔结构的高分子吸附剂，属于多孔性交联聚合物，是继离子交换树脂后发展起来的一类新型分离介质，根据大孔树脂化学结构不带或带有不同极性的功能基团以及树脂的表面性质，通常将大孔树脂分为非极性、弱极性和中极性等类型。大孔吸附树脂具有网络结构良好，比表面积大、稳定性高、再生简便、条件温和、使用周期长、费用低等优点，现已广泛应用于提取纯化天然植物中的活性成分，如皂苷、黄酮、内酯、生物碱等。

本发明所公开的利用大孔吸附树脂制备积雪草总皂苷的方法，所选择的树脂对积雪草总皂苷吸附量大、解吸容易，产品回收率和含量较高，而且方法简便，可操作性强，利于大规模生产运用，能够降低生产成本。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用大孔吸附树脂制备积雪草总皂苷的方法。

方法的步骤如下：

1)积雪草干草中加入6～14倍重量，体积浓度为50～90％的乙醇水溶液浸泡、提取三次，提取液合并，减压浓缩去除乙醇，浓缩液用水稀释后过滤，定容后得到积雪草总皂苷水溶液；

2)在层析柱中装入经预处理的大孔吸附树脂，树脂柱高径比为3～9；

3)积雪草总皂苷水溶液以0.5～3BV/h的流速过树脂柱，至流出液中积雪草总皂苷穿透；

4)先用2～8个床层体积的水洗涤树脂柱，接着用体积比为20～80％的有机溶剂-水混合流动相以0.5～3BV/h的流速洗脱积雪草总皂苷，洗脱液经薄层色谱分析后合并，再经浓缩、结晶、真空干燥后得产品积雪草总皂苷；

5)树脂柱分别经体积比为60～90％的有机溶剂-水混合溶剂和水冲洗再生后可重复使用。