[发明专利]异种干细胞动物子宫内胎儿移植生产异种动物干细胞方法

说明书

技术领域

本发明涉及了一种异种干细胞动物子宫内胎儿移植生产异种动物干细胞方法。它涉及移植学领域、及生物工程领域、医药学领域。为解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，提供被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，能够应用异种动物干细胞实施针对它种动物的干细胞子宫内胎儿移植，在出生后生长为成体它种动物的生存期内，分离获得在成体它种动物体内存在的异种动物干细胞方法与实验方法。例如应用被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，把人的造血干细胞植入胎羊或胎猪等动物胎儿体内，在出生后生长为成体动物的生存期内，通过每年实施多次造血干细胞动员，能够在成体动物外周血中分离得到，可供实施多位具有相同HLA移植配型、或HLA移植配型只有几个位点差异的临床人体造血干细胞移植的，足够多的人造血干细胞。解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题。

背景技术

造血干细胞来源匮乏，是移植学没有解决的难题。本发明为能够解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，提供被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，应用异种动物干细胞，实施针对它种动物的干细胞子宫内胎儿移植，能够在出生后生长为成体它种动物的生存期内，分离获得在成体它种动物体内存在的异种动物干细胞方法与实验方法。

①在上个世纪末：Zanjani等建立人造血干细胞-绵羊胎儿子宫内移植物模型，采用子宫内移植方法把人造血干细胞植入胎羊，该模型经检测在胎羊骨髓内有人造血干细胞集落形成并维持超过130d，取第一代模型初级受体的人造血干细胞进行二次移植，第二代模型次级受体骨髓仍有人造血干细胞集落形成……骨髓、脐血、成人外周血及纯化的后的CD34⁺CD38^-、CD34⁺Thy-1^-、CD34⁺HIADR^-干细胞均可移植成功。Shimizu等把人骨髓CD34⁺/c-kit^low细胞植入胎羊，发现新鲜分离的细胞在出生后的羊体内形成嵌合体，取出生后的羊骨髓进行二次移植胎羊，显示新分离细胞也有形成嵌合体的能力。Yin等给胎羊植入1.5×10⁵个人的CD34⁺CD133⁺细胞，60d后，大约羊出生25d左右，羊体内出现人的细胞，再将此细胞进行二次移植，60d后，取羊的骨髓发现，人的多向分化祖细胞占骨髓单核细胞的0.1％~2.14％。Zanjani等建立人间充质干细胞-胎羊动物模型，移植2周后的PCR检测分析表明，人源细胞广泛分布在大多数组织，包括肝、脾、骨髓、胸腺、肺、脑、肌肉、心脏和血；13个月后，在肝脏、骨髓、心脏、软骨和血中，通过PCR仍能够检测到人源细胞。②体细胞动物克隆：在理论上，体细胞核移植后端粒的长度可以恢复。体细胞克隆牛的胚胎细胞、新生牛的细胞、成体牛的细胞的端粒长度，与年龄相仿的对照组动物细胞的端粒长度没有显著差异。日本科学家实施的体细胞克隆猪的实验，取体细胞克隆猪的体细胞核，实施体细胞动物的再克隆，已经能够依次再克隆出生命状态良好的第5代克隆猪。③有被科学界公认的足够充分的生物科学理论、科学结论、生物生命机制、实验-试验科学研究结果相关科学依据，能够综合科学论证——证实：采用被科学界公认的干细胞子宫内移植方法，把人的造血干细胞植入胎羊或胎猪，在出生后生长为成体动物的生存期内，通过每年实施多次造血干细胞动员，能够在成体动物外周血中将能够分离得到，可供实施多位具有相同HLA移植配型、或HLA移植配型只有几个位点差异的临床人体造血干细胞移植的，足够多的人造血干细胞。与实施把猪的造血干细胞植入胎羊，在出生后生长为成体动物的生存期内，在成体羊外周血中分离得到，足够多的猪的造血干细胞，再实施针对多只猪的造血干细胞移植等：移植学多个不同相关生物学科-跨生物学科的综合基础科学研究实验。将能够为移植学实验-试验科学研究，解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，提供足够充分的移植学综合基础科学研究实验科学依据。并且通过实施把人脐血造血干细胞移植给动物胎儿方法，解决造血干细胞来源匮乏等移植学难题，不存在伦理学争议。④如果能够得到伦理学委员会的谅解——批准，可以应用终止人妊娠10~26周堕胎胎儿的分离胎肝细胞，实施把人胎肝细胞植入胎羊或胎猪；不仅能够在成体动物外周血中分离得到足够多的人的造血干细胞，而可以获取拥有人肝细胞嵌合体的动物肝脏，将能够被临床应用于实施更好的紧急救治发生急性肝衰竭患者的：应用拥有人肝细胞嵌合体的动物肝脏，实施较长时间体外持续灌流支持治疗-ECLP，而有可能使发生急性肝衰竭患者受到严重损伤的肝脏得到再生-恢复；或应用拥有人肝细胞嵌合体的动物肝脏，实施暂时性的人肝细胞嵌合体的动物肝脏辅助移植、或背驮肝脏移植支持治疗，将可以较长时间维持发生急性肝衰竭患者的生存时间，使其有机会等待到拯救其生命的人的肝脏实施再移植手术。