[发明专利]替考拉宁的提纯方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离糖肽类抗生素替考拉宁的提纯方法，具体地 说，涉及一种从2～20W/V％的替考拉宁水溶液中分离替考拉宁的提 纯方法。

背景技术

现今存在的关于替考拉宁制备的工艺专利中，制备工艺主要为发 酵液经碱化后过滤，滤液经树脂吸附后，用解吸剂将对树脂进行解吸， 解吸液经过活性炭脱色，滤液加溶剂沉淀，过滤即得替考拉宁湿品。 然后用树脂或层析剂进行进一步精制，其中的树脂主要为大孔吸附树 脂，解吸剂为有机溶剂的水溶液，最后加大量的溶剂进行沉淀。

以上的方法在具体的生产中已经得到充分的应用，证明效果也不 错。但其中最大的问题就是最后的沉淀这一步需要用到大量的有机溶 剂，这样会大大地加重环保的压力，同时因为去除杂质的工序较多， 收率低。如果能将这种沉淀方法改变一下，不使用有机溶剂或减少有 机溶剂的使用，能使产品收率和质量同时提高，那不但能降低产品的 原料成本，也能减少环境污染，从而企业的经济效益和社会效益都会 得到很大的提高。

通常来说，物质能从溶液中结晶出来，根本原因就是其在溶液中 的溶解度变小了。而要改变其溶解度，方法一般有改变温度、调节 pH值、加盐、加有机溶剂等几种，其中加有机溶剂这种方法由于要 使用到大量的有机溶剂，会加大对环保的压力，所以现不予考虑。另 外替考拉宁的溶解度随着温度的变化而变化幅度不是很大，所以如果 要通过改变温度使其结晶出来很难。而本发明选择了调节pH和加盐 这两种方式。

发明内容

因此，本发明提供了一种从2～20W/V％的替考拉宁水溶液中分 离替考拉宁的提纯方法。

根据本发明的一方面，一种分离替考拉宁的提纯方法，包括将 2～20W/V％的替考拉宁水溶液用盐酸溶液调节pH＝2.5～6.0。

其中，上述2～20W/V％的替考拉宁水溶液通过如下步骤制得：

(1)替考拉宁发酵液在碱性条件下用过滤器过滤，得到滤液；

(2)滤液通过大孔树脂进行柱层析，分别用水洗、甲醇或丙酮 有机溶剂的酸性水溶液进行洗脱，得到洗脱液；

(3)洗脱液通过活性炭脱色、过滤，得到脱色滤液；

(4)在pH＝7.0～11.0下通过分子量为200Da～1000Da纳滤膜或 5000Da～30000Da的超滤膜浓缩，并不断加入去离子水去除有机溶剂， 制得2～20W/V％的替考拉宁水溶液。

最好，2～20W/V％的替考拉宁水溶液通过1μm的滤芯过滤。

最好，在温度为5～25℃下，搅拌混合液30～90分钟，然后静置 12～36小时。

最好，过滤后采用pH＝2.5～6.0、温度为0～10℃的水顶洗。

最好，所述盐酸浓度为1M。

根据本发明的另一方面，一种分离替考拉宁的方法包括向2～20 W/V％的替考拉宁水溶液中加入5～20W/V％碱金属无机盐、或碱土 金属无机盐或铵盐；待上述盐溶解后，用盐酸或氢氧化钠调至 pH＝2.5～11。

其中，2～20W/V％的替考拉宁水溶液通过如下步骤制得：

(1)替考拉宁发酵液在碱性条件下用过滤器过滤，得到滤液；

(2)滤液通过大孔树脂进行柱层析，分别用水洗、甲醇或丙酮 有机溶剂的酸性水溶液进行洗脱，得到洗脱液；

(3)洗脱液通过活性炭脱色、过滤，得到脱色滤液；

(4)在pH＝7.0～11.0下通过分子量为200Da～1000Da纳滤膜或 5000Da～30000Da的超滤膜浓缩，并不断加入去离子水去除有机溶剂， 制得2～20W/V％的替考拉宁水溶液。

最好，2～20W/V％的替考拉宁水溶液通过1μm的滤芯过滤。

最好，在温度为5～25℃下，搅拌混合液30～90分钟，然后静置 20～40小时。

最好，过滤后采用pH＝2.5～6.0、温度为0～10℃的水顶洗。

最好，所述碱金属无机盐包括碱金属无机卤化物；所述碱土金属 无机盐包括碱土金属无机卤化物。

其中，所述碱金属无机卤化物包括氯化钠、氯化钾、氯化锂、溴 化钠、溴化钾、溴化锂、碘化钠、碘化钾。

其中，所述碱土金属无机卤化物包括氯化镁、氯化钙、氯化钡。