[发明专利]转ads基因提高青蒿中青蒿素含量的方法

权利要求书

1.一种转ads基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征在于，从青蒿中克隆紫穗槐二烯合成酶ADS基因，构建含ads基因的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将ads基因转入青蒿并再生出植株，PCR检测外源目的基因ads的整合情况，高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定转基因青蒿中青蒿素的含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。

2.根据权利要求1所述的转ads基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征是，包括如下具体步骤：

(1)采用基因克隆方法获得青蒿关键酶基因ads；

(2)把ads基因可操作性地连结于表达调控序列，形成含ads基因的植物表达载体；

(3)将含ads基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得用于转化青蒿的含ads基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；

(4)利用所构建的根癌农杆菌菌株转化青蒿，获得经PCR检测的转基因青蒿植株；

(5)对获得的转基因青蒿中青蒿素含量进行高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定，获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。

3.根据权利要求2所述的转ads基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征是，所述的经PCR检测的转基因青蒿植株是指，设计合成ads基因的引物，进行DNA扩增，紫外线下观察到目的条带的阳性株系即为转基因青蒿植株。

4.根据权利要求2所述的转ads基因提高青蒿中青蒿素含量的方法，其特征是，所述的高效液相色谱法及蒸发光散射检测器测定青蒿植株中青蒿素含量，方法为：色谱柱C-18反相硅胶柱，流动相为甲醇∶水，甲醇∶水的体积比为70∶30，柱温30℃，流速1.0mL/min，进样量10μL，蒸发光散射检测器漂移管温度40℃，放大系数为7，载气压力5bar。