[发明专利]一种血清钙测定试剂

说明书

技术领域

本发明涉及生物试剂，具体涉及一种血清钙测定试剂。

背景技术

钙是人体内含量最多的无机物之一，约占体重的1.5～2％，99％以上分布在骨骼中，其余寸在于体液及其他组织。血钙大部分存在于血清中，红细胞内含量甚微。血清钙约50％以游离的钙存在，45％与血浆蛋白结合。通常，具有生理活性的是游离的钙离子，而无生理活性的叫结合钙，但是，它们二者可以互相转化。一般认为血清钙指的是血清总钙，而游离钙离子即是离子钙。血清钙在维持人体神经、肌肉的应急功能、维持细胞的正常新陈代谢等方面具有重要的作用。

目前，用于测定人体血清钙的方法主要有以下几种：

一、邻甲酚肽络合酮比色法

该方法采用邻甲酚肽络合酮作为金属络合指示剂，在碱性溶液中，可与钙作用，生成紫色络合物。但该方法由于受其他金属离子的干扰，重复性较差。

二、酶法

酶法测定钙虽然具有准确度好，精密度高的优点，但因其试剂成本很高，且酶容易受环境影响，试剂也不很稳定。

三、电极法

该法使用比较简便、快速，但需要特殊的仪器设备。

因而，上述方法用于测定人体血清钙都有一定缺点。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计一种准确度好，试剂成本低的用于测定人体血清钙试剂。

本发明提供了一种测定人体血清钙试剂。本发明的测定人体血清钙试剂由下列试剂1和试剂2组成：

试剂1：缓冲液其浓度为：0.01-0.1摩尔/升、叠氮钠pH6.0

试剂2：显色剂其浓度为0.01—1.0克/升、遮避剂其浓度为0.02—2.0克/升。

上述试剂中：

显色剂：偶氮胂III 0.01—1.0克/升；

缓冲液：MES(2-(N-吗啡啉)乙磺酸)，TAPSO(N-三(羟甲基)甲氨基-2-羟基丙烷磺酸)，ADA(N-(2-乙酰胺)亚氨基二乙酸)，ACES(N-(2-乙酰胺)-2-氨基乙磺酸)，DIPSO(3-[N，N-二(羟乙基)氨基〕-2-羟基丙磺酸)，BES(N，N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸)，MOPS(吗啉代丙烷磺酸)之一；

浓度为：1.0-200摩尔/升；

遮避剂：8—羟基喹啉，琥珀酸，邻苯二甲酸，酒石酸，邻苯二甲酸之一或它们的两种或两种以上的混合物；

浓度为：0.02—2.0克/升；

本发明试剂可用于人体血清钙的测定。采用新的检测方法—偶氮胂III比色法进行测定。其具有准确度好，抗干扰强，重复性高，试剂成本低的特点。

附图说明

图1本发明实例1测定结果；

X：电极法检测结果，Y：本发明的检测结果。

具体实施方式

实例1

试剂1

MES：20.4克

叠氮钠：1克

Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)：1毫升

Brij 35(聚环氧乙烯月桂酰醚)：      1毫升

pH6.0

试剂2

8—羟基喹啉：0.8克

偶氮胂III 0.09克

Triton X-100：1毫升

Brij 35：      1毫升

叠氮钠：1克

试剂1的配制：在1升的烧杯种加入800毫升的去离子水，再依次加入MES20.4克的缓冲液，1克叠氮钠，1毫升Triton X-100，1毫升的Brij 35，待溶解完全后，用盐酸调节pH值至6.0，然后添加去离子水至1升。

试剂2的配制：在1升的烧杯种加入800毫升的去离子水，再依次加入0.09克偶氮胂III，0.8克8—羟基喹啉，1克叠氮钠，1毫升Triton X-100，1毫升的Brij 35，待溶解完全后添加去离子水至1升。

检测：

实验步骤一、加3微升的标准液与200微升本法配制的试剂1，5分钟后读取吸光度A1_标准液，再添加100微升本法配制的试剂2，5分钟后读取吸光度A2_标准液，计算吸光度变化值△A_标准液；

实验步骤二、制作标准工作曲线

实验步骤三、加3微升的标准液与200微升本法配制的试剂1，5分钟后读取吸光度A1_样本，再添加100微升本法配制的试剂2，5分钟后读取吸光度A2_样本，计算吸光度变化值△A_样本