[发明专利]白介素1β特异分子小鼠光学成像系统的建立及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种转基因非人哺乳动 物的用途，以及利用所述动物筛选抗炎症物质的方法。

背景技术

炎症，是指组织或器官对有害刺激或损伤所产生的一种防御反应。机体的 这种炎症反应机制，可以抵御微生物的入侵，促进组织损伤的修复，但过于剧 烈的炎症反应，却可使组织坏死，造成功能障碍，甚至可迅速危及病人的生命， 如SARS，急性重症肝炎等；而长期的不适当的炎症反应是许多慢性疾病的重要 病理机制，如肝硬化、慢性肾炎、风湿性关节炎等。最近的研究还显示，许多 肿瘤的发生和发展也与长期的炎症反应有密切的关系；而动脉硬化、神经退行 性疾病、糖尿病等在一定程度上也可以看成一种炎症反应。

炎症反应是一个非常复杂的过程，许多细节还有待进一步的深入研究，其 中最典型的是大量炎症细胞向炎症部位的聚集和侵润，以及大量炎症因子在体 内的表达。

因此，建立可以用于炎症研究和抗炎症药物筛选的模型，对于研究和开发 新的抗炎症类药物，治疗一大类涉及人类重大健康问题的疾病是非常有价值 的。而现有的炎症研究模型往往因不是体内模型而无法真实地反映体内炎症进 程，或者需要通过把动物模型在不同的时间点宰杀进行研究，操作复杂且研究 成本高，限制了抗炎症药物的开发。

发明内容

本发明的目的在于提供一种转基因非人哺乳动物的用途。

本发明的另一目的在于提供利用所述转基因动物作为模型，筛选抗炎症药 物的方法。

在本发明的第一方面，提供一种转基因非人哺乳动物的用途，所述动物的 基因组中含有一基因表达盒，所述表达盒从5’到3’端依次具有以下元件：白 介素1β启动子，报告基因，终止子；所述的转基因动物用于筛选抗炎症的物 质。

在另一优选例中，所述的非人哺乳动物选自：小鼠、大鼠、兔、狗、猿猴。 优选的，所述的非人哺乳动物是鼠；更优选的是小鼠。

在另一优选例中，所述表达盒中，在白介素1β启动子之前，还含有鸡cHS4 绝缘子基因。

在另一优选例中，所述表达盒从5’到3’端由以下元件构成：白介素1β 启动子，报告基因，终止子；或者由以下元件构成：鸡cHS4绝缘子基因，白介 素1β启动子，报告基因，终止子。在各元件之间，还可含有不影响基因表达 的一些序列，如为了连接各元件而设置的酶切位点的部分序列。

在另一优选例中，所述的报告基因选自：荧光素酶编码基因，绿色荧光蛋 白编码基因，或红色荧光蛋白编码基因。优选的，所述的报告基因是荧光素酶 编码基因。

在另一优选例中，所述的白介素1β启动子具有白介素1β转录起始位点上 游(-100±99b)～(-4.5±0.5kb)；优选的是转录起始位点上游(-50±49b)～ (-4.5±0.2kb)的序列。

在另一优选例中，所述的白介素1β启动子具有从白介素1β转录起始位点 (即-1b)到上游-4.5kb的序列。

在另一优选例中，所述的终止子是猿猴病毒40的晚聚(A)终止信号(SV40 late poly(A)signal)。

在另一优选例中，所述的炎症是白介素1β介导(或参与)的炎症。

在本发明的第二方面，提供一种制备转基因非人哺乳动物的方法，所述方 法包括：将一基因表达盒转入动物的受精卵中，培育所述受精卵从而获得所述 转基因非人哺乳动物；

其中，所述表达盒从5’到3’端依次具有以下元件：白介素1β启动子， 报告基因，终止子。

在另一优选例中，所述表达盒中，在白介素1β启动子之前，还含有鸡cHS4 绝缘子基因。

在本发明的第三方面，提供一种筛选抗炎症的潜在物质(如化合物)的方 法，所述方法包括步骤：

(1)引发转基因非人哺乳动物的炎症反应，所述的转基因非人哺乳动物的 基因组中含有一基因表达盒，所述表达盒从5’到3’端依次具有以下元件： 白介素1β启动子，报告基因，终止子；

(2)将候选物质给予转基因非人哺乳动物；

(3)检测动物体内报告基因的表达；其中，若所述候选物质可抑制报告基 因的表达，则表明该候选物质是抗炎症的潜在物质。

在另一优选例中，步骤(1)和步骤(2)可同时进行；或依次进行，即先进行 步骤(1)再进行步骤(2)，或相反。