[发明专利]打结丝线在丝状真菌繁殖上的应用及丝状真菌的繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属于工业微生物领域，具体地说涉及丝线在丝状真菌繁殖上的应用，以及丝状真菌利用丝线的繁殖方法。

背景技术

难降解有机污染物在被微生物分解时速度很慢且不彻底，在环境中的残留时间长，造成环境污染严重。研究发现白腐真菌能降解多种难降解有机污染物，因而成为治理难降解污染物的有效途径。但是至今尚未能实现白腐真菌反应器在非灭菌条件下的持续运行，其主要原因在于不能长期维持反应器中白腐真菌的生物量。

维持白腐真菌的生物量主要有两种方法：一是菌丝的无限生长；二是白腐真菌的繁殖。尽管丝状真菌可以通过菌丝的生长而无限延伸，但这需要提供最适宜的培养条件，这在废水污染物的处理中难以实现，例如：自然界中的白腐真菌一般生长在陆生环境；不能排除污染物对白腐真菌的干扰等，这就使得白腐真菌在反应器中的生命是有限的。因此，要长期维持反应器中白腐真菌的生物量就唯有通过繁殖的方法实现。

白腐真菌的繁殖方式有两种：一是孢子繁殖；二是菌丝繁殖。白腐真菌在液体培养条件下现在只能获得其休眠的厚垣孢子。而菌丝的繁殖就相对简单，只需将菌丝打断即可(菌丝具有全能性)。采用菌丝球打断繁殖的方式可以实现反应器中白腐真菌的更新，且不用添加新的菌丝(Brochert，M等，Biotechnologyand bioengineering，2001，75(3)，313-321.))。因此，可以采用阶段性打断菌丝进行繁殖生长来维持反应器中白腐真菌生物量。但采用自由悬浮培养白腐真菌时，白腐真菌的生物活性不如固定的白腐真菌培养，即固定的白腐真菌比非固定的白腐真菌活性强(Liao W.-L.等，Water sci.tech.1997，35(8)，255-164；OhmomoS.等，Agric.Boil.Chem.1985，49(9)，2551-1555)。因而添加适宜的载体可以提高白腐真菌的活性。

与采用自由悬浮培养的菌丝球打断进行白腐真菌繁殖相比，利用载体促进白腐真菌生长，并采用一定手段将载体上附着的菌丝周期性打断，再利用打断的菌丝进行繁殖来维持反应器中白腐真菌生物量，更有利于白腐真菌反应器的持续运行。因此利用载体繁殖的方法需要合适的载体。这种载体必须符合两个条件：在液体环境下，用于繁殖的打断菌丝能很好地附着其上进行生长；附着生长在载体上的菌丝能被有效地打断下来用于繁殖。

目前对一些载体进行了研究，如聚氨酯泡沫(PUF)(Mielgo I.等，Waterresearch，2002，36，1896-1901)、钢丝网(Kapdan IK等，Enzyme Microb Technol，2002；30：195-9.)，木块(Nillsson I.等，Enzyme and microbial technology，2006，38，94-100.)等，但木块和聚氨酯泡沫(PUF)等载体在水中不易下沉，漂浮在液体表面，而打断菌丝比重大于水，在液体环境下极容易下沉，因而不利于打断菌丝的附着，因此不能在实际中应用。另外，在对附着菌丝打断时，发现钢丝网等材料容易变形而不适合用于菌丝的打断；因此利用这种方法维持反应器中丝状真菌生物量的关键就在于寻找新的符合要求的载体。

发明内容

本发明目的之一是针对丝状真菌反应器因生物量降低不能持续运行的问题，提供了一种丝线作为载体的用途，即利用丝线作为载体促进丝状真菌生长的方法，来维持反应器中丝状真菌的生物量。

本发明的另一目的是提供了利用丝线作为载体繁殖丝状真菌的方法。

本发明打结丝线在丝状真菌繁殖上的应用。

所述的丝状真菌可以是白腐真菌。

上述白腐真菌可以是黄孢原毛平革菌、云芝(Trametes versicolor)；毛栓菌(Trametes hirsu)或糙皮侧耳(Pleurotus ostrea)等之一种。

上述打结丝线是由线结固定，结两端的细线散开。

所述的细线由天然植物的纤维丝组成。

所述的天然植物可以是棉、麻、亚麻等。

上述打结丝线可以打结棉线。

所述的打结棉线，由棉线结所固定，结两端的细线散开。

上述打结棉线，其中在结的每一边有长度为60～240mm的细线10～60根。

上述打结棉线，其重量为0.48～1.1g；比表面积平均为：0.9～4m²/g m²/g。

上述打结棉线的制备方法，按照如下步骤进行：