[发明专利]超氧化物歧化酶微胶囊的制备方法

说明书

技术领域

超氧化物歧化酶的微囊化，产品适于医疗药品、保健食品和生物化工产品等领域。

背景技术

超氧化物歧化酶是体内一种重要的氧自由基清除剂，能够平衡机体的氧自由基，从而避免当体内超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应。将超氧化物歧化酶与微囊技术结合，制成超氧化物歧化酶微囊在国内外尚未见到相关文献报道。目前，由于天然超氧化物歧化酶稳定性差，使其应用面受到限制。

将超氧化物歧化酶制成微囊产品，既提高了超氧化物歧化酶的稳定性，防止空气、水分、光线等因素引起活性成分的变化，利于人体吸收，又能减少超氧化物歧化酶产品对胃肠道的直接刺激，更便于进一步制成便于运输的，具有保健功能的药品、食品或生物化工产品等。

发明内容

本发明实现了超氧化物歧化酶的微囊化，从而提高了超氧化物歧化酶的稳定性与有效生物利用度，并改善了产品的加工性能。本发明首次以蒸馏水作为反应体系，制备出的微胶囊从圆整度、粒径分布、颗粒间粘连情况、表面光滑程度，都符合产品化要求。

本发明提供一种超氧化物歧化酶的微囊化的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将乙基纤维素和牛初乳粉碎，分别过筛；量取二氯甲烷；将过筛后的60至120目的乙基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A；

(2)将粉碎后的80至120目的牛初乳和超氧化物歧化酶按1∶4至4∶1的质量比混合，得到二者混合物；将牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶加入到混合液A，边加边搅拌，至完全溶胀，得到混合液B，静置；牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶与乙基纤维素的质量比为3∶1至5∶1；

(3)将十二烷基磺酸钠溶于蒸馏水中，搅拌至溶液澄清，得到溶液C，水浴控温，搅拌；

(4)将混合液B加入溶液C中，继续搅拌，直至二氯甲烷挥发完全，微胶囊形成；

(5)微胶囊形成后，将其进行减压抽滤；所得到的微胶囊用蒸馏水冲洗，通风干燥，得到粉末状微胶囊，干燥保存。

溶液C的量加到能使二氯甲烷挥发完全，且形成微胶囊即可，没有严格的质量要求。

本发明得到微胶囊，与油相制备体系相比，微胶囊表面较光滑，圆整度较好，大小均一，无粘连现象，粒径范围分布在200～300μm。此外，由于超氧化物歧化酶属于极性的蛋白质类物质，本法采用的极性的水反应体系，有利于保持超氧化物歧化酶的生物活性。

附图说明

图1：实施例1的超氧化物歧化酶微胶囊扫描电镜图

图2：实施例2的超氧化物歧化酶微胶囊扫描电镜图

图3：实施例3的超氧化物歧化酶微胶囊扫描电镜图

具体实施方式

实施例1：分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过筛后的120目乙基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。将粉碎后的80目牛初乳和超氧化物歧化酶按1∶1的质量比混合，得到二者混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物缓慢加入到混合液A，牛初乳和SOD的混合物与乙基纤维素质量比为5∶1，边加边搅拌，至完全溶解，得到混合液B静置。取十二烷基磺酸钠，溶于10mL蒸馏水中，搅拌至溶液澄清，得到溶液C，放入水浴中在转速为300rpm下搅拌，水浴温度32℃。将混合液B加入溶液C中，继续以转速为300rpm搅拌，直至十二烷基磺酸钠挥发完全。微胶囊形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶囊用蒸馏水冲洗，40℃下通风干燥1小时，得到粉末状微胶囊。以转速为300rpm，囊心囊材比分别为5∶1条件下形成的微囊颗粒饱满，粘连少，圆整度优良，平均粒径约在205μm。

实施例2：分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过筛后的120目乙基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。将粉碎后的100目牛初乳和超氧化物歧化酶按1∶1的质量比混合，得到二者混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物缓慢加入到混合液A，牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物与乙基纤维素质量比为3∶1，边加边搅拌，至完全溶解，得到混合液B，静置。取十二烷基磺酸钠，溶于10mL蒸馏水中，搅拌至溶液澄清，得到溶液C。放入水浴中在转速为300rpm下搅拌，水浴温度32℃。将混合液B加入溶液C中，继续以转速为300rpm搅拌，直至十二烷基磺酸钠挥发完全。微胶囊形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶囊用蒸馏水冲洗，45℃下通风干燥1小时，得到粉末状微胶囊。以转速为300rpm，囊心囊材比分别为3∶1条件下形成的微胶囊粘连度较好，圆整度较好，平均粒径约在187μm。