[发明专利]一种高效液相色谱法测定西多福韦有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及西多福韦有关物质的分析方法，特别是一种西多福韦有关物质的高效液相色 谱法测定方法。

背景技术

西多福韦是嘧啶类抗病毒药，用于治疗艾滋病。分子式为C₈H₁₄N₃O₆P·2H₂O，化学名为 1-[(S)-3-羟基-2-(膦酰基甲氧基)丙基]-胞嘧啶二水合物，其化学结构式如下：

西多福韦的主要中间体杂质有4个，其在西多福韦的合成过程中生成，对于最终产品的 质量控制是非常重要的。

西多福韦酸性强，通常对于极性强的化合物，可采用特殊色谱柱，例如季铵盐柱；也可 采用常用普通色谱柱，加入相应的离子对试剂。本法采用普通的色谱柱(C18色谱柱)快速 准确的实现了西多福韦有关物质的测定，从而实现了西多福韦中间体杂质的控制，保证了西 多福韦及其制剂的质量可控，具有现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种用高效液相色谱法分析测定西多福韦有关物质的方法，可用于 西多福韦的制备过程和最终产品的质量控制。

本发明提供一种用高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，采用了普遍常用的十八 烷基硅烷键和硅胶为填料的色谱柱，以甲醇为有机相与水相的混合溶剂作为流动相。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，流动相中的有机相为甲 醇，甲醇与水相的比例为：30～10∶70～90

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，流动相中的有机相为甲 醇，甲醇与水相的比例为：15∶85。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，所述水相为磷酸盐缓冲 液，其pH范围为3～6。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，所述磷酸盐选自磷酸二氢 钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢铵的一种或其混合物。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，所述水相中的阳离子对试 剂为0.5％～1％四丁基氢氧化铵。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，所述磷酸盐为磷酸二氢 钠。

本发明提供一种高效液相色谱测定西多福韦有关物质的方法，可按以下方法实现

取西多福韦适量，用10％甲醇水溶液溶解，配制成每1ml含西多福韦1mg的样品溶液， 流速为1ml/min，检测波长260nm，选用C18色谱柱，柱温25℃，取样品溶液10ul，注入高 效液相色谱仪，完成西多福韦有关物质的测定。

1)取西多福韦或含西多福韦的制剂样品适量用10％甲醇水溶液溶解或稀释样品，并 配制成每1ml约含西多福韦1mg的样品溶液。

2)设置流动相流速为0.5～1.5ml/min，流动相的流速优选为1ml/min；检测波长220～ 280nm，最佳检测波长为260nm；选用C18色谱柱；色谱柱柱温20～30℃，柱温 最佳为25℃。

3)取1)的样品溶液10～30ul，优选10ul，注入高效液相色谱仪，完成西多福韦有 关物质的测定。

本发明能够有效测定西多福韦的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可 靠。可用于西多福韦及含有西多福韦的药物的质量控制。

附图说明

图1西多福韦及其中间体杂质的液相色谱图

图2西多福韦原料的高效液相色谱图

图3西多福韦注射液的高效液相色谱图(辅料空白)

图4西多福韦注射液的高效液相色谱图

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1

仪器与条件

日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱：C18 250×4.6mm，5μm，紫外检测波 长：260nm，流动相：磷酸盐缓冲液(0.1mol/L磷酸二氢钠，1％四丁基氢氧化铵，用10％ 稀磷酸调pH为4.50)/甲醇-(80-20)

实验步骤