[发明专利]核酸和血管活性剂相组合用于加强的基因投递

权利要求书

1.体内靶向基因表达的方法，所述方法包括通过动脉内直接注射至供给组织或器官的动脉以传递载体，其中载体含有编码欲在该动脉供给的血管床中表达的蛋白质的转基因，其中所述动脉内注射与用血管活性剂灌注动脉同时进行或在用血管活性剂灌注动脉之后进行。

2.权利要求1的方法，其中在注射所述载体之前至少约2分钟将所述血管活性剂灌注至动脉中。

3.权利要求1的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂或血管内皮生长因子(VEGF)蛋白。

4.权利要求1的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂。

5.权利要求1的方法，其中所述载体是病毒载体。

6.权利要求5的方法，其中所述病毒载体是复制缺损的腺病毒载体。

7.权利要求5的方法，其中所述病毒载体是腺伴随病毒载体。

8.权利要求6的方法，其中通过注射传递约10⁷至10¹³个腺病毒载体颗粒。

9.权利要求8的方法，其中通过注射传递约10¹¹个腺病毒载体颗粒。

10.权利要求1的方法，其中所述转基因与组成型启动子可操作相连。

11.权利要求1的方法，其中所述转基因与组织特异性启动子可操作相连。

12.权利要求1的方法，其中所述转基因与心室肌细胞特异性启动子可操作相连。

13.权利要求12的方法，其中所述心室肌细胞特异性启动子具有心室肌球蛋白轻链-2的序列。

14.权利要求12的方法，其中所述心室肌细胞特异性启动子具有肌球蛋白重链启动子的序列。

15.权利要求1的方法，其中所述转基因编码血管生成蛋白或肽。

16.权利要求15的方法，其中所述血管生成蛋白或肽选自aFGF，bFGF，FGF-4，FGF-5和VEGF。

17.权利要求1的方法，其中所述转基因编码血管生成蛋白或肽，其中通过冠内直接注射至一个或两个冠状动脉将载体传递至患者的心肌中，籍此促进所述患者心肌中冠状侧血管的生成。

18.权利要求17的方法，其中所述血管生成蛋白或肽选自aFGF，bFGF，FGF-4，FGF-5和VEGF。

19.权利要求17的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂或血管内皮生长因子蛋白。

20.权利要求17的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂。

21.权利要求17的方法，其中所述载体是病毒载体。

22.权利要求17的方法，其中所述病毒载体是复制缺损的腺病毒载体或腺伴随病毒载体。

23.权利要求17的方法，其中所述冠内注射深入至左和右冠状动脉腔内至少约1cm。

24.权利要求17的方法，其中除了冠状动脉外，所述冠内注射还深入至隐静脉移植物或乳房内部动脉移植物腔内至少约1cm。

25.权利要求17的方法，其中所述方法包括三次注射，一次注射至左前降冠状动脉(LAD)，一次注射至左旋(LCx)冠状动脉，一次注射至右冠状动脉。

26.权利要求1的方法，其中所述转基因编码β-肾上腺素能信号传导蛋白，其中通过冠内直接注射至一个或两个冠状动脉将载体传递至患者的心肌中。

27.权利要求26的方法，其中所述β-肾上腺素能信号传导蛋白选自β-肾上腺素能受体(β-AR)，G-蛋白受体激酶抑制剂(GRK抑制剂)和腺苷酸环化酶(AC)。

28.权利要求26的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂或VEGF。

29.权利要求26的方法，其中血管活性剂是组胺或组胺激动剂。

30.权利要求26的方法，其中所述载体是病毒载体。