[发明专利]马先蒿木脂素类化合物、制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种马先蒿木脂素类化合物、制备方法及应用，属于天然植物提取技术领域。

背景技术

近年来，自由基清除剂及抗氧化剂在食品氧化变质中的作用越来越受到人们的关注。抗氧化剂主要分为两类，一类是天然物质，如维生素E、维生素C、维生素A、黄酮类化合物等，其特点为低毒、低活性、不稳定。另一类为合成抗氧化剂，如叔丁基对羟基茴香醚(butylatedhydroxyanisol，简称BHA)、二丁基羟基甲苯(butyiated hydroxytolune，简称BHT)等，活性高、且稳定，目前被广泛用于食品中。但由于其具有潜在的毒性和致癌作用越来越受到人们的排斥，因此寻找低毒、高效的天然抗氧化剂就成为一种必然趋势。

马先蒿属植物资源丰富，药用种类繁多，有的种类在民间应用历史悠久。从马先蒿属植物中已分离出环烯醚萜、黄酮、苯丙素类化合物。其中苯丙素类化合物显示出较强的抗氧化、抗肿瘤等生物活性。现有技术中没有马先蒿提取物抗氧化活性和抗运动疲劳活性方面的报道。

发明内容

本发明目的是提供一种从天然植物马先蒿提取的具有抗氧化活性的提取物、从提取物分离的化合物及其立体异构体作为活性成分，用于制备天然抗氧化剂和抗运动疲劳药物方面的应用。    

本发明的目的是这样实现的：这种马先蒿木脂素类化合物包括：从密穗马先蒿植物提取的马先蒿正丁醇提取物、马先蒿乙酸乙酯提取物或从马先蒿正丁醇提取物分离得到的马先蒿木脂素甲Densispicoside A化合物(1)及立体异构体(+)-isolarisiresinol 3a-O-β-D-glucopyranoside化合物(2)，化合物(1、2)的结构如式1和式2所示。

所述马先蒿木脂素类化合物的制备方法，按照如下步骤制备：

A、样品粉碎：将11kg密穗马先蒿(Pedicular is dens isp ica Franch)干样用植物粉碎机粉碎至40-80目；

B、提取：以3倍于马先蒿粉碎物重量的95％乙醇为溶剂，将粉碎好的样品在50℃恒温条件下热提取3次，第1次4小时，第2次与第3次均为3小时，纱布过滤，合并滤液得到提取液；

C、脱脂：将提取液减压浓缩得到的1.1kg浸膏溶于5L水中，用3×5L石油醚处理水相，分层后，分液除去石油醚部分，剩余为脱脂后的水相部分；

D、马先蒿正丁醇提取物的制备：将脱脂后的水相部分用3×5L正丁醇萃取，回收后减压浓缩至干，得正丁醇提取物。

所述马先蒿木脂素类化合物的制备方法，化合物(1)马先蒿木脂素甲Densispicoside A和化合物(2)(+)-isolarisiresinol 3 a-O-β-D-glucopyranoside的制备是将步骤D得到的正丁醇提取物用200-300目柱层析硅胶拌样后，均匀地将拌样硅胶装于上层，用氯仿-甲醇梯度洗脱，条件(vol∶vol)为100∶0；95∶5；90∶10；80∶20；70∶30；

在氯仿-甲醇80∶20洗脱段得的组分用半制备型高效液相色谱进一步分离，色谱柱：Zorbax ODS-C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流动相：甲醇∶水为1∶4；收集保留时间16min和21min时的两个组分，减压浓缩分别得到化合物Densispicoside A(10mg)和化合物(+)-isolarisiresinol 3a-O-β-D-glucopyranoside(25mg)。

所述马先蒿木脂素类化合物的制备方法，马先蒿乙酸乙酯提取物的制备是将步骤D提取正丁醇部分后的水相部分用3×5L乙酸乙酯萃取，回收后减压浓缩至干，得乙酸乙酯提取物。

所述马先蒿木脂素类化合物作为制备抗氧化和抗运动疲劳药物活性组分的应用，其特征在于：按常规制剂方法，以马先蒿正丁醇提取物、马先蒿乙酸乙酯提取物、马先蒿木脂素甲Densispicoside A化合物(1)或立体异构体(+)-isolarisiresinol 3a-O-β-D-glucopyranoside化合物(2)其中一种或几种为1份计作为活性组分，加入1-99份口服制剂辅料制成浓缩丸、片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。