[发明专利]凝固检查用试剂及其试剂的生产方法

权利要求书

1.一种凝固检查用试剂，其含有：

磷脂与以昆虫或昆虫培养细胞为宿主所获得的重组组织因子的复合物；以及

来源于所述昆虫或昆虫培养细胞的可溶性成份。

2.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述重组组织因子为具有可溶性区域和跨膜区的重组牛组织因子。

3.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述重组组织因子有序列号1所示的氨基酸序列、或由所述氨基酸序列中的1个或数个氨基酸被缺失、附加或取代而获得的氨基酸序列。

4.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述重组组织因子所具有的氨基酸序列与序列号1所示的氨基酸序列有至少95％的相同性。

5.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述昆虫为鳞翅目昆虫。

6.权利要求5所述试剂，其特征在于：所述鳞翅目昆虫是家蚕。

7.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述来源于昆虫或昆虫培养细胞的可溶性成份包含来源于所述昆虫或昆虫培养细胞的可溶性蛋白质。

8.权利要求1所述试剂，其特征在于：所述凝固检查用试剂是第II、第VII、第IX、第X因子测定用试剂、肝促凝血活酶试验用试剂或凝血致活酶时间用试剂。

9.权利要求1所述试剂，其特征在于：其还包含选自于由第I因子、第V因子、硫酸钡吸附血浆和钙离子构成的组群中的至少一种成份。

10.一种凝固检查用试剂的生产方法，包括以下步骤：

将组织因子的cDNA插入杆状病毒DNA中获得重组杆状病毒，让昆虫或昆虫培养细胞感染此重组杆状病毒；

在所述昆虫或昆虫培养细胞中让用所述cDNA编码的重组组织因子进行表达；

破碎表达所述重组组织因子的昆虫或昆虫培养细胞，从含所得破碎物的溶液中去除不溶性成份，获得含所述重组组织因子的可溶性组份；以及

混合所述可溶性组份和磷脂，合成所述重组组织因子和磷脂的复合物。

11.权利要求10所述方法，其特征在于：所述cDNA对牛组织因子的可溶性区域和跨膜区编码。

12.权利要求10所述方法，其特征在于：所述cDNA对具有序列号2所示的氨基酸序列、或由所述氨基酸序列中的1个或数个氨基酸被缺失、附加或取代而获得的氨基酸序列的重组组织因子进行编码。

13.权利要求10所述方法，其特征在于：所述cDNA所编码的重组组织因子有与序列号2所示氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列。

14.权利要求10所述方法，其特征在于：在获得所述可溶性组份的步骤中，含破碎物的溶液含有表面活性剂。