[发明专利]槐米黄酮提取物在制备尿酸转运子URAT1抑制药物中的应用

说明书

技术领域：本发明涉及槐米黄酮提取物在制备尿酸转运子URAT1抑制药物方面的应用。

背景技术：尿酸排出减少或生成增加，可导致血液中尿酸浓度增高，直接或间接引起相关疾病。尿酸的排泄是一复杂过程，尿酸随血液循环流入肾小球时，游离型的尿酸将全部滤过；在近端肾小管约99％尿酸盐被重吸收(Diamond HS，MeiselAD.Post secretory reabsorption of urate in man.Arthritis And Rheumatism，1975，18(6)：805-809.)。位于近曲小管的尿酸转运子(蛋白)URAT1参与尿酸重吸收过程，通过与阴离子的交换将尿酸盐由管腔转运入细胞。URAT1蛋白主要分布于肾皮质近曲小管上皮细胞向腔膜，是一个电中性的尿酸转运蛋白。URAT1基因由Enomoto等于2002年首先从人肾脏克隆出来，位于染色体11q13，由SLC22A12基因编码，由10个内含子9个外显子组成，拥有12个跨膜结构域，其cDNA全长2642bp，编码区1659bp，编码含555个氨基酸的蛋白质。原发性肾低尿酸血症(hypouricemia)病人的SLC22A12基因缺陷病例进一步证明人的URAT1(hURAT1)参与尿酸的重吸收(Atsushi Enomoto，Hiroaki Kimura，ArthitChairoungdua，Yasuhiro Shigeta，et al.Molecular identification of arenal urate-anion exchanger that regulates blood urate levels.Nature，2002，417(6887)：447-452)。槐米中富含天然黄酮类成分，通过有效的提取分离纯化精制步骤可得到高含量的黄酮提取物。

发明内容

本发明的目的在于提供槐米黄酮提取物的新用途，具体地说是提供槐米黄酮提取物在制备尿酸转运子URAT1抑制药物中的应用。

本发明的技术解决方案之一：槐米采用碱提酸沉法提取，加蒸馏水重结晶，得到槐米黄酮提取物分别通过葡聚糖凝胶柱分离纯化得到槐米黄酮提取物1以及酸法水解、纯化得到槐米黄酮提取物2。经HPLC定量，槐米黄酮提取物1含芦丁98％，槐米黄酮提取物2含槲皮素98％。

本发明的技术解决方案之二：提供槐米黄酮提取物1和2用于制备尿酸转运子URAT1抑制药物的新用途。该新用途包括了以本发明所述的槐米黄酮提取物1和2，配以本领域的技术人员所熟知的药用辅料(赋形剂、助溶剂、控释剂等)，制成本领域的技术人员所熟知的剂型(包括口服液、注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、微囊剂等)，用于制备尿酸转运子URAT1抑制药物。

本发明的优点是，提供了对尿酸转运子URAT1具有确切抑制调节作用的槐米黄酮提取物1和2，用于制备尿酸转运子URAT1抑制药物，可用于治疗与尿酸转运子URAT1异常高表达相关疾病。与针对痛风或者高尿酸血病症的发明比较，本发明提供的槐米黄酮提取物新用途具有3个明显的进步和优点：1、成分明确(分别为含芦丁98％的槐米黄酮提取物1和含槲皮素98％的槐米黄酮提取物2)；2、作用靶点明确(尿酸排泄过程中重吸收作用的尿酸转运子URAT1)；3、调节作用明确(抑制调节)。

本发明利用高尿酸血动物模型在基因转录水平和蛋白表达水平上科学地评价并确定了槐米黄酮提取物对尿酸转运子URAT1的抑制调控作用。

本发明所涉及的槐米黄酮提取物1和2对模型动物表达异常增高的尿酸转运子URAT1具有确切的抑制作用；而对正常动物的正常水平的尿酸转运子表达无显著抑制作用，具有很好的安全性。

为了更好的理解本发明的实质，下面将用槐米黄酮提取物1和2的提取精制、药理实验及结果来说明其在制备尿酸转运子URAT1抑制药物中的应用。

具体实施方式：以下实施例仅作为进一步阐述发明之用，不能用来限制本发明。

实施例1：槐米黄酮提取物1和2的制备

槐米沸水提取(石灰乳调pH8~9)，提取液趁热抽滤，反复提取三次，合并滤液，浓盐酸调pH3~4，酸水液放置析晶抽滤沉淀干燥后按1∶200加水重结晶，精制得到黄酮提取物。

上述黄酮提取物葡聚糖凝胶柱分离纯化，得到槐米黄酮提取物1。

上述黄酮提取物按照1∶100加2％H₂SO₄煮沸水解2小时-→冷却抽滤后残渣水洗至中性，用95％乙醇重结晶后过聚酰胺柱层析纯化，得到槐米黄酮提取物2。

经HPLC法检测：槐米黄酮提取物1含芦丁98％