[发明专利]微生物转化D－果糖制备D－阿洛酮糖的菌种和方法

权利要求书

1.一株转化D-果糖制备D-阿洛酮糖的菌种，其分类命名为球形红杆菌(Rhodobacter sphaeroides)SK011，保藏编号为CCTCC NO：M 207185。

2.用权利要求1所述球形红杆菌(Rhodobacter sphaeroides)SK011菌株转化D-果糖制备D-阿洛酮糖的方法，其特征是

A、菌株的培养：

(1)出发菌株：球形红杆菌(Rhodobacter sphaeroides)SK011；

(2)保藏培养基：葡萄糖营养琼脂培养基；

(3)种子培养基：葡萄糖1-10g/L，玉米浆10-100g/L，尿素1-20g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.1-5g/L，KH₂PO₄ 0.1-5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1-5g/L，pH 7.0，去离子水配制；

种子培养条件：用250mL三角瓶装25-70mL种子培养基，按常规方法灭菌、冷却、接种后于30-45℃，150-250r/min摇床培养12-24h作种子培养液；

(4)发酵培养基组成：玉米浆10-100g/L，尿素1-5g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.1-5g/L，KH₂PO₄ 0.1-5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1-5g/L，pH 7.0，去离子水配制；

发酵条件：用250mL三角瓶装25-70mL培养基，按常规方法灭菌、冷却、接种后于30-45℃，150-250r/min摇床培养12-24h后添加1.5g/L的D-塔格糖作为诱导物继续培养12-24h；

B、生物转化：

(1)将培养所得到的发酵液进一步处理得到的湿菌体、冻干菌粉、透性化细胞或固定化细胞作为细胞生物催化剂；

(2)将D-果糖按0.1％-75％的比例配制成水溶液作为生物转化底物反应液；

(3)将细胞生物催化剂，加入底物反应液进行转化反应；生物转化反应条件为：底物D-果糖浓度为0.1％-75％，细胞生物催化剂以游离细胞计对底物溶液的用量为10-200g/L；初始pH 5.0-10.0，转化反应温度为20-50℃，150-250r/min摇床培养，转化反应时间0.5-24h；

C、提纯与精制：将转化反应结束后的反应液用D001型强酸性苯乙烯树脂进行离子交换，去离子水洗涤，再经U20专用树脂纯化，浓缩，结晶，干燥后即得成品D-阿洛酮糖。