[发明专利]一种快速鉴定耐盐鸢尾种群的分子检测方法

权利要求书

1.快速鉴定耐盐鸢尾种群的分子检测方法，其特征是根据给出的目标植株即鸢尾属植物进行DNA提取，对特有的9个引物序列进行DNA扩增，获得微卫星分子标记数据，将分子标记数据采用Arlequin 3.11软件进行分析，得到植株的种群判别与归类；其中9个微卫星引物的序列：

(1)引物序列

01  Forward Primer(5′to 3′)GAA GTT TTG TAG AGG TCT GGT G

Reverse Primer(5′to 3′)GCT ACA ACT AAA GAG TCC AGT C

02  Forward Primer (5′to 3′)GAG AAA GAA GGA GGA GGA AGG

Reverse Primer (5′to 3′)CAG CAA CTG TGA GGA GAA AG

03  Forward Primer(5′to 3′)GCA CAT AAC CTC TCT TGT CC

Reverse Primer(5′to 3′)ACC AGA CTA CGA ATC ATT ACC C

04  Forward Primer(5′to 3′)TTC AAG CCT CTA CTA GAG AGA C

Reverse Primer(5′to 3′)GCAACC TTG TAA CCA TCC C

05  Forward Primer(5′to 3′)TTT CCT CCC TCT ACT CAT TCC

Reverse Primer(5′to 3′)CTA GCT AAG CGA GCT AAC AC

06  Forward Primer(5′to 3′)AGC GGA AAG AAT GAA CAC AAG

Reverse Primer(5′to 3′)GCG AAG AAG GAG CAA ATA GTA G

07  Forward Primer(5′to 3′)CCT CCT TCT TCA GAC CCG TAG

Reverse Primer(5′to 3′)CGG CGG CGA GAA AAG TAG

08  Forward Primer(5′to 3′)TGG TCC TAA GTG ACT GAT AGT G

Reverse Primer(5′to 3′)GGA GTA GAG AGT GAC ATG GAG

09  Forward Primer (5′to 3′)GTG CGA GAT ATA AGG GAA AGA C

Reverse Primer (5′to 3′)GAT ATT ACC CAT GCT AAG GCA G。

2.根据权利要求1所述的快速鉴定耐盐鸢尾种群的分子检测方法，其特征是微卫星标记的扩增条件为：

(1)1-5号引物的退火温度为50度；6号为60度；7-9号为65度；

(2)微卫星标记PCR反应体系：

10X Buffer w/15mM MgCl₂(1.0ul)

10mM dNTP mix(0.2ul)

10uM Forward primer(0.25ul)

10uM Reverse primer(0.25ul)

Taq polymeras(5U/ul)(0.05ul)

dH₂O(7.25ul)

DNA(～15ng)(1.0ul)。