[发明专利]大肠杆菌打孔质粒载体、其构建方法及在制备菌蜕中的应用无效
| 申请号： | 200710193754.3 | 申请日： | 2007-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN101182538A | 公开（公告）日： | 2008-05-21 |
| 发明（设计）人： | 刘思国;王春来;常月红;刘惠芳 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66;C12N1/21 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 孙皓晨;费碧华 |
| 地址： | 150001黑龙江*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 打孔 质粒 载体 构建 方法 制备 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种大肠杆菌打孔质粒载体pBV-E，其特征在于：由噬菌体溶菌基因E和pBV220载体组成。
2.一种构建权利要求1的大肠杆菌打孔质粒载体pBV-E的方法，包括：以噬菌体PhiX174双链DNA为模板，以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为引物进行PCR扩增，得到溶菌基因E；将溶菌基因E纯化后用T4DNA连接酶与经EcoR I和BamH I双酶切消化的pBV220载体相连接，即得。
3.权利要求1的大肠杆菌打孔质粒载体pBV-E在制备大肠杆菌菌蜕中的应用，包括：在含氨苄青霉素的LB中接种含打孔质粒载体pBV-E的大肠杆菌，28℃过夜震荡培养，然后转接于含氨苄青霉素的LB中，28℃震荡培养至OD600nm达0.4左右；取出100μl培养物备用，将剩余培养物迅速调高到42℃培养以诱导E基因表达，继续培养3-5小时；取诱导前后的培养物各100μl适当稀释后涂LB平板进行活菌CFU检测；溶菌结束后形成的ghost菌蜕用PBS洗涤3次，冻干保存。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，未经中国农业科学院哈尔滨兽医研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200710193754.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：卷烟包装机小包封签检测装置
- 下一篇：耐高温加固型双环裤夹
