[发明专利]粉虱座壳孢菌菌丝生长培养基

说明书

所属技术领域    本发明涉及一种昆虫病原真菌培养基，特别是粉虱座壳孢菌菌丝生长培养基。

背景技术

粉虱座壳孢菌(Aschersonia aleyrodis Webber)属于丝孢菌类，腔孢纲，球壳目，鲜壳孢科，座壳孢属，广泛分布于拉丁美洲、南亚和东南亚。粉虱座壳孢菌作为重要的病原真菌在害虫(主要是粉虱和介壳虫)的生物防治中发挥着重要作用。利用虫生真菌粉虱座壳孢来防治白粉虱如甘薯白粉虱和温室白粉虱这两种世界性经济害虫，已取得了成功。前苏联高加索及黑海沿岸，从我国四川引进粉虱座壳孢防治柑桔粉虱，防治效果达95％以上。福建省用挂枝法引进粉虱座壳孢，10多年来推广应用面积达10万亩(次)，四川省应用推广面积达2万亩(次)，有效地控制了柑桔粉虱发生。华南、西南、浙江、台湾等省推广这一技术，也收到明显效果。与挂枝法相似的是四川省芦山县苗溪茶场采用在茶园中放置带有座壳孢虫尸的枝叶，成功地控制了1000多亩角蜡蚧、牡蛎蚧等介壳虫的为害。但是，目前国内外尚无关于粉虱座壳孢菌培养基研究的报道，真菌通用的培养基不能很好满足该菌生长发育的需求，这极大地限制了该菌的开发利用。

技术内容    本发明目的是综合利用碳源、氮源、金属离子和维生素配制成适合于粉虱座壳孢菌菌丝生长的培养基。

本发明的粉虱座壳孢菌菌丝生长培养基，除水外各原料为干燥化合物，纯度为分析纯。

一种粉虱座壳孢菌菌丝生长培养基，由可溶性淀粉、胰蛋白胨、氯化钙、叶酸、氯化钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和水组成，各种原料及其含量的关系如下：

原料                    原料重量比百分率(％)

可溶性淀粉              0.20～11.00

胰蛋白胨                0.05～2.75

氯化钙                  0.01～0.04

叶酸                    0.01～0.09

氯化钾                  0.04～0.05

硫酸镁                  0.04～0.05

磷酸二氢钾              0.04～0.05

磷酸氢二钠              0.05～0.06

水                      85.91～99.58

生防制剂在商业化之前，培养基的选择尤为重要，合适的培养基能充分发挥其致病力和毒力。同样地，培养基能影响真菌杀虫剂的孢子萌发、菌丝生长和产孢。本发明各物质性能稳定，分别以可溶性淀粉为碳源，以胰蛋白胨为氮源，提供了该菌生长所需的碳元素和氮元素；加入的生长因子--维生素则是调节微生物正常代谢所必需的；加入的无机盐是微生物细胞内分子的结构成分，并具有生理调节物质和酶激活剂的功能；还使用磷酸氢盐调节培养基的酸碱度，维持该菌生长所需的最适pH值；满足了该菌菌丝生长的营养需要。本发明的粉虱座壳孢菌丝生长培养基，摇瓶培养7天菌丝干重可达0.355克/100毫升培养基。

具体实施例    为了更充分地公开本发明的一种粉虱座壳孢菌培养基，下面结合实施例加以说明。

实施例：一种粉虱座壳孢菌菌丝生长培养基，各种原料及其含量的关系如下：

原料                    原料重量比百分率(％)

可溶性淀粉              1.50

胰蛋白胨                3.01

氯化钙                  0.01

叶酸                    0.01

氯化钾                  0.05

硫酸镁                  0.05

磷酸二氢钾              0.05

磷酸氢二钠              0.06

蒸馏水                  95.26

按上述培养基配方混合溶解后高压灭菌30分钟即可使用。

具体培养方法如下：

菌丝生长：将0.1毫升孢子液接种于装有100毫升液体培养基的250毫升锥形瓶中，置于恒温摇床(150转/分钟)上25±1℃培养7天。