[发明专利]一种兔抗人MK单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用无效
| 申请号： | 200710301302.2 | 申请日： | 2007-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN101255194A | 公开（公告）日： | 2008-09-03 |
| 发明（设计）人： | 姚行;戴利成;钱福初 | 申请（专利权）人： | 湖州市中心医院 |
| 主分类号： | C07K16/24 | 分类号： | C07K16/24;C12N5/16 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 | 代理人： | 徐关寿 |
| 地址： | 313000*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 兔抗人 mk 单克隆抗体 及其 杂交瘤 细胞株 应用 | ||
1、一种兔抗人MK单克隆抗体，由以下方法获得：以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞，与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合，选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞，进行亚克隆并扩大培养，得到所述兔抗人MK单克隆抗体。
2、如权利要求1所述的兔抗人MK单克隆抗体，其特征在于所述GST-MK融合蛋白由如下方法制备得到：将MK的cDNA目的基因插入含有GST基因的质粒中、接在GST基因下游，得到重组质粒，重组质粒转化大肠杆菌BL21，以含氨苄青霉素的培养基进行扩大培养，至OD600值达到0.3～0.6时加入异丙基硫代半乳糖苷诱导表达，得到表达GST-MK融合蛋白的菌体，再经PBS重悬、细胞破碎、离心，得到所述GST-MK融合蛋白。
3、如权利要求2所述的兔抗人MK单克隆抗体，其特征在于所述含有GST基因的质粒为pGEX-1λT。
4、一种产生如权利要求1所述兔抗人MK单克隆抗体的杂交瘤细胞株，由以下方法获得：以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞，与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合，选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞，即为所述杂交瘤细胞株。
5、如权利要求1所述的兔抗人MK单克隆抗体在组织MK表达中的应用。
6、如权利要求1所述的兔抗人MK单克隆抗体在血清MK浓度检测中的应用。
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