[发明专利]一种增强土著根瘤菌固氮能力的生物源激活剂

权利要求书

1、一种增强土著根瘤菌固氮能力的生物源激活剂，其特征在于，采用以下方法制成：

(1)将保藏编号为CCTCC №：M207141的哈茨木霉Trichoderma harzianum菌株T216接种到装有150mL液体培养基的三角瓶中，于27±1℃下转速为150转/分，培养60小时，作为发酵种子用；

液体培养基组分为：可溶性淀粉10g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄ 1g，MgSO·7H₂O 0.5g，CaCO₃ 0.25g，(NH₄)₂SO₄ 2g，水1000mL，PH自然，经115℃灭菌15-20分钟；

(2)发酵罐发酵：将第(1)步所得木霉菌种子培养液按10％(V/V)的接种量接入发酵罐进行发酵培养，发酵控制参数为：

温度控制，分为两个阶段，发酵第一阶段，即菌体培养阶段0-72小时，26-28℃；发酵第二阶段，即代谢产物生产阶段72-100小时，23-25℃；

通气量(V/V)：0-20小时：1∶0.6；20-40小时：1∶0.8；40-80小时：1∶1.2，80小时以后：1∶0.6；搅拌速度：250-300rpm；

初始pH值控制为6.5-6.8，前24小时维持在初始值；

发酵罐培养基组分：1.5-2.0％麦麸汁液，0.5-1.0％葡萄糖，2.0-3.0％玉米粉，1.0-2.0％酵母膏，0.1-0.5％CaCO₃，0.01-0.03％MgSO₄，0.5-0.8％KH₂PO₄和K₂HPO₄，pH值为6.5-6.8，余量为水；通入蒸气达121℃在位灭菌30分钟；所述百分比均为重量百分比；

(3)发酵完成后，发酵液用氢氧化钠溶液调pH为7-8，闷罐过夜，灭菌纱布真空过滤，得滤液，密封包装，即成。