[发明专利]稀有鲫β型雌激素受体及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学及环境生物学领域，其中涉及一种β型雌激素 受体及其编码基因，以及采用该β型雌激素受体作为标记物检测水生环境 化学毒性的方法和用于诊断水生动植物疾病的试剂盒。

背景技术

雌激素是一种类固醇激素，其在体内是由芳香化酶催化雄激素转化而 来的。雌激素呈脂溶性，具有众多靶组织和靶器官，其中包括生殖系统、 骨骼、心血管等。目前在人体内发现的雌激素有三种：雌二醇、雌酮和雌 三醇。通过研究发现，雌激素是通过与细胞内相应的雌激素受体结合从而 启动转录、翻译等下游事件，产生相应的生理学效应，进而调控生长、发 育、配对、繁殖等一系列生命事件。

20世纪70年代，Jesen和Jacobsen等利用放射性同位素的方法发现 雌激素的信号是由雌激素受体(ER)介导的，雌激素受体是一种与雌激 素有高度亲和力的蛋白。至1986年，ER蛋白被纯化，Greene及其领导的 两个研究小组分别完成了对ER的克隆[Greene，G.L，Gilna，P.和Water，M.， Sequence and expression of human estrogen receptor complementary DNA Sciences，231：1150-1154(1986)]，并分别在Nature和Science杂志上发表 了论文。至此，人们一直认为ER只有一种构型，所有的雌激素效应和抗 雌激素效应都是由这种受体来调节。直到1996年，Kuiper在对大鼠前列 腺研究时，在大鼠的前列腺中发现了一种新的ER蛋白[Kuiper，G.G.， Enmark，E.，Pelto-Huikko，M.，Cloning of a novel estrogen receptor expressed in rat prostate and ovary.Proc Nat Acad Sci USA，93：5925-5930(1996)]，随 后在人类中也发现了该蛋白的基因，人们把先前发现的称为ERα，把后来 发现的称为ERβ。

雌激素受体的结构。ER(包括ERα和ERβ)属于糖蛋白，其特异性 强、亲和力高、结合容量低、受热容易破坏，是甾体激素核受体超家族中 的成员，也是一类具有配体激活域的核转录因子。ERα和ERβ由不同基 因编码，Enmark等研究发现人类ERβ基因定位于人类染色体14q22-24处； ERα基因位于人类染色体6q25.1处，均含有8个外显子[Enmark，E.， Pelto-Huikko，M.，Gradien，K.，Lagercrantz，S.，Lagercrantz，J.，Fried，G.， Nordenskjold，M.，Gustafsson，J.A.，Human estrogen receptorβ-gene structure， chromosomal localization，and expression pattern，The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 82：4258-4265(1997)]。ERα基因长约140kb， 其蛋白含595个氨基酸；ERβ基因因内含子长度不同而远小于ERα基因， 长约为40kb，ERβ蛋白含530个氨基酸。