[实用新型]莱克多巴胺ELISA检测试剂盒

说明书

(一)技术领域：

本实用新型涉及动物源性食品中药物残留量的检测试剂盒，特别是检测动物源性食品中莱克多巴胺残留量的试剂盒。

(二)背景技术：

莱克多巴胺(Ractopamine)是一种苯乙醇胺类药物。用于畜牧渔业，它是一种“营养再分配剂”，属于β-兴奋剂，莱克多巴胺作为“瘦肉精”的替代品，效果好、经济回报高、使用普遍；用于医药，它是一种强心药，可用于治疗肥胖症和肌肉萎缩症。但人累计摄入剂量超过一定值，或食用莱克多巴胺高残留的内脏组织时，出现中毒反映，症状表现为骨骼肌肉收缩增加，破坏快缩肌纤维与慢缩肌纤维之间的融合，引发肌肉震颤，四肢和面部的肌肉尤为明显，其它中毒症状包括心动过速、心率失常、腹痛、肌肉疼痛、恶心和晕眩等，因此我国禁止使用，我国农业部第176号公告规定莱克多巴胺为禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物。因此，检测莱克多巴胺在动物性食品种的残留量是非常必要的。

目前，常用于莱克多巴胺残留检测的方法主要有微生物法和仪器分析法。微生物检测法虽然经济、操作简便，但在样本中有其他微生物抑制剂存在时，其灵敏度和特异性受到限制；高效液相色谱分析法、气谱、气质联机法等单纯的仪器分析方法，虽然灵敏度高，但样本前处理及测定操作烦琐，费用高，不适宜于大量样本的筛查。

(三)实用新型内容：本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的莱克多巴胺残留检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中莱克多巴胺含量的测定，减少了检验样本所需要的时间。

本实用新型的技术方案是：采用96孔聚苯乙烯试剂板作为固相载体，放入真空铝铂袋中，在试剂盒酶标板微孔条上预包被莱克多巴胺偶联抗原制成检测板，以塑料硬膜为盖板膜，将40ml浓缩洗涤液、50ml浓缩复溶液、12ml酶标二抗、0.8ml莱克多巴胺抗体浓缩液、7ml显色液A液、7ml显色液B液、7ml瓶1ml高浓度标准品溶液，试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶和玻璃瓶盛装并固定在泡沫塑料模具中与试剂板、盖板膜一同封装在盒内，以便于携带和运输。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。检测时，样本中的残留物(莱克多巴胺)将和酶标板微孔条上预包被的偶联莱克多巴胺抗原竞争抗莱克多巴胺抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中所含残留物(莱克多巴胺)的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中莱克多巴胺的残留量，其操作简便易行。

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：肉样品的最低检测限为1μg/kg、肝样品的最低检测限为2μg/kg、尿液的最低检测限为1μg/L、配合料的最低检测限为25μg/kg、浓缩料/预混料的最低检测限为75μg/kg；尿液的回收率为80％±10％、组织(肉/肝)的回收率为75％±10％、饲料的回收率为60±20％；同多巴酚丁胺的交叉反应率约为13％、同克伦特罗的交叉反应率为＜0.1％、同沙丁胺醇的交叉反应率为＜0.1％。相对于其他莱克多巴胺残留检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、匀质器、振荡机和微量加样器，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。

本实验新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于动物源性食品中莱克多巴胺残留的检测。

(四)附图说明：

图1为本实验新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)；

图2为本实验新型酶联板的俯视图；

图3为本实验新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)；

图4为本实验新型盖板膜平面图；

图5为本实验新型试剂瓶纵剖面平面图；

图6为本实验新型固定泡沫模具的俯视图。