[发明专利]抗分泌型卷曲相关蛋白－4(SFRP－4)的抗体

说明书

发明领域

本发明一般涉及免疫球蛋白、抗体和其片段。具体地，本发明涉及分泌型卷曲相关蛋白4型(SFRP-4)结合剂的制备及其用途。

发明背景

Wnt基因家族编码在分化和发育中起关键作用的蛋白质。Wnt蛋白质与卷曲(Frizzled)家族的七次跨膜受体相互作用并激活导向细胞核的信号途径。Dennis等人，J.Cell Sci.，112(21)：3815-20(1999)。Wnt-1信号转导的主要生物化学效应是细胞质(β)-联蛋白的稳定化，细胞质(β)-联蛋白与Lef/tcf家族的转录因子结合，调节基因表达。最近鉴定了一类新的分泌蛋白——分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)，它们与卷曲蛋白的细胞外的配体结合结构域相似，提示额外的机理可以调节Wnt信号转导。

SFRP-4是可溶性细胞外糖蛋白，其通过结合到Wnts或卷曲受体而拮抗Wnt/卷曲途径的信号功能。SFRP-4在脑、肾、肺、卵巢、前列腺、乳腺和子宫内膜中表达并且对于细胞存活显示出复杂的功能。Jones等人，Bioessays 24：811-20(2002)。已经提出SFRP-4涉及骨代谢(Fujita等人，Geriat.and Gerontol.Intern.4：175-80(2004))，排卵(Drake等人，Apoptosis 8：389-97(2003))，肿瘤抑制(Hrzenjak等人，J.Path.204：19-27(2004)；Horvath等人，Clin.Cancer Res.10：615-25(2004))并且被表征为与骨软化相关的肿瘤表达的循环的尿磷酸盐增多因子(Berndt等人，JClin Invest 112：785-94(2003))。由于涉及这些生物过程，已经认为SFRP-4是癌症、激素调节的生殖性组织疾病和神经变性领域的潜在生物标志(即，生物学标志)。因此，本领域需要用于靶定(例如结合)和/或调节SFRP-4多肽的额外的物质。

发明概述

本发明提供了用于靶定和/或调节SFRP-4多肽的物质。本发明提供了抗体组合物，其免疫特异性结合选自SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：4；和SEQID NO：5的SFRP-4多肽；并且免疫特异性结合SEQ ID NO：2的多肽。该抗体可以是多克隆抗体；单克隆抗体；嵌合抗体；人源化抗体；和抗体相关的多肽。

本发明还提供了制备和使用本发明抗体的方法。本发明因此提供了药物组合物，其含有可药用载体中的本发明抗体。本发明提供了分离的核酸，其编码免疫特异性结合SFRP-4多肽的抗体或其片段。本发明还提供了含有本发明核酸的载体和宿主细胞。

本发明还提供了治疗或预防分泌型卷曲相关多肽4型-相关病症的方法。该病症可以是脑癌；乳腺癌；前列腺癌；子宫癌；脾脏癌；胰腺癌；结肠癌；直肠癌；小肠癌；胃癌；食管癌；缺血引起的细胞凋亡，心力衰竭；心肌梗塞；中风；神经变性疾病；亨廷顿舞蹈症；外周脱髓鞘病；多发性硬化；阿尔茨海默氏病；肌萎缩侧索硬化；帕金森病；创伤；冠心病；炎症；或炎性肠病。本发明提供了通过施用本发明的抗体调节多肽的表达或活性的方法。

因此，本发明通过了抗体组合物的用途，用于生产治疗分泌型卷曲相关多肽4型相关病症的药物。

附图简述

附图通过实例描述了优选实施方案，并且不作为限制。

图1显示了His标记的SFRP-4多肽的蛋白质印迹分析。小图A显示了48小时(左泳道)和144小时(右泳道)培养后在10μl培养上清液中检测到免疫反应性His标记的SFRP-4多肽。小图B显示了含有His标记的SFRP-4的培养上清液(48小时样品)的去糖基化处理的效果。泳道1：在含有His标记的SFRP-4的培养上清液(48小时样品)中观察到的SFRP-4免疫反应性蛋白质；泳道2：在模拟品处理的含有His标记的SFRP-4的培养上清液(48小时样品)中观察到的SFRP-4免疫反应性蛋白质；泳道3：在PNGase处理的含有His标记的SFRP-4的培养上清液(48小时样品)中观察到的SFRP-4免疫反应性蛋白质。

图2是曲线图，显示了SFRP-4ELISA标准曲线。