[发明专利]调节免疫应答的方法和试剂

说明书

相关申请案交叉索引

本申请案主张于2006年2月21日提交的美国临时专利申请案No.60/774,614的优先权， 其全文以参考的形式并入本文。

联邦政府资助研究声明

本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)基金No.CA108609的资 助下，得到美国政府支持而完成的。美国政府拥有本发明的某些应得权利。

背景技术

适应性免疫系统T细胞监测在所有体内细胞中是否存在致病蛋白。因为这个因素，由蛋 白酶体生成的肽被呈递到MHC I类分子上，其可通过CD8+T细胞识别，而溶酶体降解 产物被呈递到MHC II类分子上，其可通过CD4+T细胞识别。被呈递到MHC II类分子 上的抗原一般是外源性蛋白，其被位于分泌系统中的抗原呈递细胞(APC)或内源性蛋 白吞噬。但是，分析从MHC II类分子洗脱下来的肽，人们得知大部分的天然MHC II类 配体(多达20％)是来自胞质蛋白和核蛋白。另外，有证据表明CD4+T细胞可识别内 源性处理之后的胞质抗原和核抗原，例如，胞质麻疹病毒和A型流感病毒可内源性处理 用于MHC II类呈递。相应地，内源性MHC II类呈递已被描述为可用于其他病毒性抗原、 自体抗原、模式抗原以及肿瘤抗原。所以，拓扑结构上隔离于内体系统的抗原可进入MHC II类抗原呈递途径并拓宽MHC II类配体谱。

已经讨论了内源性MHC II类抗原呈递的不同处理途径。最近，已经证明自体吞噬能将胞 质抗原和核抗原传递到MHC II类分子上。其中，在生理水平上发现，EB病毒(EBV) 核抗原1(EBNA1)，在巨自噬降解之后，作为第一病原性抗原，在EBV转化的B细胞 系的MHC II类分子上呈递。

自噬由真核细胞中普遍分布的至少三种细胞内蛋白降解途径构成，巨自噬、微自噬和分 子伴侣介导的自噬。有关内源性MHC II类抗原处理的大量证据已经暗示了巨自噬途径。 在巨自噬降解过程中，将包括细胞器在内的胞浆物质包裹在双膜包覆的自噬体内，其随 后与核内体和溶酶体融合。然后，自噬体包裹的内容物被溶酶体水解酶分解，降解产物 由细胞回收。

这个途径的运行在理论上，使得进入MHC II类呈递途径的手段被当作提高免疫应答的手 段，尽管目前这一手段还是未知的。

发明内容

在一个实施例中，提供一种核酸，其编码相关肽或蛋白，该核酸在编码框内与另一种核 酸融合，后者编码自噬体LC3蛋白，或其功能性片段，其中所述相关肽或蛋白在主要组 织相容性复合体(MHC)II类分子上的呈递不够理想或根本未予有效呈递。

在另一实施例中，该核酸拥有一个与SEQ ID NO：1同源或对应的序列。在另一个实施例 中，相关肽或蛋白经病毒编码，并且在一个实施例中，相关肽或蛋白经流感病毒编码， 而在另一个实施例中，是基质蛋白，在另一个实施例中，该核酸拥有一个与SEQ ID NO： 2同源或对应的序列。

在另一个实施例中，提供一种载体或细胞，其包含本文描述的核酸。在另一个实施例中， 提供一种细胞，其包括本文描述的载体。

在一个实施例中，提供一种方法，该方法用于刺激或增强相关肽或蛋白在主要组织相容 性复合体(MHC)II类分子上的呈递，该方法包括将能表达主要组织相容性复合体(MHC) II类分子的细胞与编码相关肽或蛋白的核酸接触，该核酸在编码框内与另一种核酸融合， 后者编码自噬体靶向蛋白，或其功能性片段，所述自噬体靶向蛋白或其功能性片段从而 能令所述相关肽或蛋白靶向导向到自噬体，并且相关所述肽或所述蛋白的片段通过主要 组织相容性复合体(MHC)II类分子被展示到所述细胞的表面上。

在一个实施例中，该自噬体靶向蛋白是LC3蛋白。在一个实施例中，该核酸包括一个与 SEQ ID NO：1同源或对应的序列。在一个实施例中，该细胞患病。在另一个实施例中， 该细胞被感染，其中一个实施例中，该细胞感染病毒，该病毒在一个实施例中是流感病 毒，或者在另一个实施例中是HIV病毒。根据此方面，并且在一个实施例中，相关肽或 蛋白经病毒编码，在一个实施例中，是经牛痘病毒编码或慢病毒编码。在一个实施例中， 相关肽或蛋白是基质蛋白，而在一个实施例中，根据此方面的核酸拥有一个与SEQ ID NO： 2同源或对应的序列。