[发明专利]组合物和用于植物中N聚糖的人源化和最优化的方法

权利要求书

1.已被稳定地转化以表达具有改变的N糖基化模式的糖蛋白的转 基因高等植物，其中所述改变的N糖基化模式的特征在于，α1，3-岩藻糖 和β1，2-木糖残基至所述糖蛋白的N聚糖的附着减少。

2.权利要求1的转基因高等植物，其中所述N聚糖不含所述岩藻糖 和木糖残基。

3.权利要求1或权利要求2的转基因高等植物，其中所述植物具有 产生具有所述改变的N糖基化模式的哺乳动物糖蛋白。

4.权利要求3的转基因高等植物，其中所述糖蛋白是目的单克隆抗 体。

5.权利要求4的转基因高等植物，其中作为所述单克隆抗体的所述 改变的N糖基化模式的结果，所述单克隆抗体具有增加的对Fcγ RIII的 结合亲和力，增加的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，减少的补体依赖性细胞 毒性(CDC)活性，或其任何组合。

6.表达具有改变的N糖基化模式的糖蛋白的浮萍植物或浮萍植物 细胞或结节，其中所术改变的N糖基化模式的特征在于，α1，3-岩藻糖残 基、β1，2-木糖残基或α1，3-岩藻糖残基和β1，2-木糖残基至所述糖蛋白 的N聚糖的附着减少。

7.权利要求6的浮萍植物或浮萍植物细胞或结节，其中所述N聚糖 不含所述岩藻糖残基，不含所述木糖残基或不含所述岩藻糖和木糖残基。

8.权利要求6或权利要求7的浮萍植物或浮萍植物细胞或结节，其 中所述浮萍植物或浮萍植物细胞或结节具有产生目的哺乳动物糖蛋白的 能力。

9.权利要求8的浮萍植物或浮萍植物细胞或结节，其中所述糖蛋白 是目的单克隆抗体。

10.权利要求9的浮萍植物或浮萍植物细胞或结节，其中作为所述 单克隆抗体的所述改变的N糖基化模式的结果，所述单克隆抗体具有增加 的对Fcγ RIII的结合亲和力，增加的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，减少 的补体依赖性细胞毒性(CDC)活性，或其任何组合。

11.包含由权利要求6至10任一项的浮萍植物或浮萍植物细胞或结 节产生的糖蛋白的组合物。

12.权利要求11的组合物，其中所述N聚糖不含所述岩藻糖和木糖 残基。

13.权利要求12的组合物，其中所述糖蛋白具有特征在于存在相 应于G0聚糖种类的单个主要的峰的N糖基化特征谱。

14.权利要求13的组合物，其中所述糖蛋白是目的单克隆抗体。

15.用于改变浮萍植物或浮萍植物细胞或结节中产生的异源性多肽 的N糖基化模式的方法，所述方法包括：

(a)抑制所述浮萍植物或浮萍植物细胞或结节中的至少一种α1，3- 岩藻糖基转移酶(FucT)的表达或功能，其中所述FucT包含具有与SEQ ID NO：3中所示的序列至少90％的序列同一性的氨基酸序列；和

(b)在适合所述异源性多肽的表达的条件下培养所述浮萍植物或浮 萍植物细胞或结节。

16.权利要求15的方法，其中所述FucT包含具有与SEQ ID NO：3 中所示的序列至少95％的序列同一性的氨基酸序列。

17.权利要求16的方法，其中所述FucT包含SEQ ID NO：3中所示 的氨基酸序列。

18.权利要求15的方法，其中通过下述方法抑制所述FucT的表达 或功能，所述方法选自：

(a)将多核苷酸或多肽导入所述浮萍植物或浮萍植物细胞或结节， 其中所述多核苷酸或多肽抑制所述FucT在所述浮萍植物或浮萍植物细胞 或结节中的表达或功能；

(b)消除所述浮萍植物或浮萍植物细胞或结节中的基因，其中所述 基因编码所述FucT；和

(c)突变所述浮萍植物或浮萍植物细胞或结节中的基因，其中所述 基因编码所述FucT。