[发明专利]微生物中酶活性的诱导和稳定

权利要求书

1.一种在产生腈水合酶的微生物内诱导酶活性的方法，所述方法 包括在含有至少50ppm的一种或多种含有酰胺基的氨基酸的培养基中培 养所述产生腈水合酶的微生物，其中，所述产生腈水合酶的微生物包括 选自由红球菌属(genus Rhodococcus)、短杆菌属(genus Brevibacterium) 及其组合组成的组的细菌，所述酶活性选自由腈水合酶活性、酰胺酶活 性、天冬酰胺酶I活性及其组合组成的组，所述一种或多种含有酰胺基的 氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺、无水天冬酰胺、天冬酰胺一水合物、 无水谷氨酰胺、谷氨酰胺一水合物及其组合组成的组。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述酶活性包括腈水合酶活 性。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述产生腈水合酶的微生物 包括红球菌属的细菌。

4.如权利要求1所述的方法，其中，所述产生腈水合酶的微生物 包括选自由紫红红球菌(Rhodococcus rhodochrous)DAP 96622和红球菌 属(Rhodococcus sp.)DAP 96253及其组合组成的组的细菌。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述一种或多种含有酰胺基 的氨基酸包括天冬酰胺。

6.如权利要求1所述的方法，其中，所述一种或多种含有酰胺基 的氨基酸以50ppm～5000ppm的浓度存在。

7.如权利要求1所述的方法，其中，所述培养基不含有任何含腈 化合物。

8.如权利要求1所述的方法，该方法进一步包括固定所述微生物。

9.如权利要求1所述的方法，其中，所述经诱导的产生腈水合酶 的微生物具有的酶活性高于或等于相同的酶在含有含腈化合物的培养基 中诱导时的活性。

10.如权利要求1所述的方法，其中，所述经诱导的产生腈水合酶 的微生物具有的酶活性比相同的酶在含有含腈化合物的培养基中诱导时 的活性高至少5％。

11.如权利要求1所述的方法，其中，所述培养基进一步含有钴。

12.如权利要求1所述的方法，其中，所述培养基进一步含有尿素。

13.如权利要求1所述的方法，其中，所述培养基进一步含有麦芽 糖或麦芽糖糊精。

14.如权利要求1所述的方法，其中，所述含有酰胺基的氨基酸包 括它们的L-异构体和D-异构体。

15.一种在酶或能产生所述酶的微生物中稳定活性的方法，所述方 法包括将所述酶或能产生所述酶的微生物与含有至少50ppm的一种或多 种含有酰胺基的氨基酸的组合物相接触，其中所述活性为选自由腈水合 酶活性、酰胺酶活性、天冬酰胺酶I活性及其组合组成的组，并且其中所 述微生物包括选自由红球菌属(genus Rhodococcus)、短杆菌属(genus  Brevibacterium)及其组合组成的组的细菌。

16.如权利要求15所述的方法，其中，所述一种或多种含有酰胺 基的氨基酸选自由天冬酰胺、谷氨酰胺和其组合组成的组。

17.如权利要求15所述的方法，其中，所述一种或多种含有酰胺 基的氨基酸以50ppm～5000ppm的浓度存在。

18.如权利要求15所述的方法，其中，所述酶或所述能产生所述 酶的微生物的活性经稳定使得在25℃的温度至少30天的时间以后，所述 酶活性保持在由所述酶或所述能产生所述酶的微生物所表现出来的初始 活性的至少50％的水平。