[发明专利]生物负荷指示剂和生物负荷的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物负荷指示剂和生物负荷的测定方法。具体而 言，本发明涉及通过分子生物学的方法客观评价应激、疲劳等生物 负荷的技术领域。

背景技术

精神的和/或躯体的应激影响包括神经、内分泌和免疫系统的宿 主防御机制(参照非专利文献1和2)。各种细胞因子(例如IL-1β、IL- 6和TNF-α等)由于应激而上调(参照非专利文献1和3)。这说明细胞 因子可能参与干扰宿主防御(参照非专利文献4)。然而，仍未充分了 解应激诱导可降低宿主防御的细胞因子的分子机制。

白介素-18(IL-18)是作为干扰素-γ(IFN-γ)诱导因子被发现的细胞 因子(参照非专利文献5和专利文献1)。IL-18具有多种生物活性，例 如Fas配体的诱导、T细胞的细胞溶解活性的提高(参照非专利文献6) 以及IL-4和IL-13的产生(参照非专利文献7)。IL-18活化Toll-样受 体2(参照非专利文献9)和骨髓分化蛋白(Myd)-88(参照非专利文献 10)。所述活化是IL-6的诱导所必需的(参照非专利文献11)。因此， IL-18参与Th1和Th2这2种细胞因子的产生(参照非专利文献12)。

IL-18作为24kD前体蛋白被产生后，通过IL-1β转化酶(ICE， 也称为胱天蛋白酶-1)加工为18kD成熟活性型(参照非专利文献 13)。胱天蛋白酶-1作为失活前体蛋白胱天蛋白酶原-1(procaspase-1) 被诱导后，通过胱天蛋白酶-11被活化(参照非专利文献14)。报道了 胱天蛋白酶-11mRNA的表达需要NF-KB的反式激活作用(参照非专 利文献15)，所述激活作用是由P38MAP激酶介导的(参照非专利文 献16)。还报道了在神经胶质瘤细胞系C6中通过作为P38MAP激酶 抑制剂的SB203580抑制通过LPS(脂多糖)对胱天蛋白酶-11mRNA 的诱导及诱导后的胱天蛋白酶-1的活化(参照非专利文献17)。

最近的研究中，报道了IL-18mRNA在肾上腺中应答促肾上腺皮 质激素(ACTH)和冷应激(cold stress)而表达(参照非专利文献18)。还 报道了在肾上腺和免疫细胞中IL-18mRNA的表达使用了不同的启动 子(参照非专利文献19)。但是，上述2个研究都没有报道成熟型IL- 18的诱导。另一方面，报道了在精神医学的患者中，血浆中的IL-18 升高(参照非专利文献20)。

在现代社会中，人们在各种各样的应激状态下工作和生活。一 般来说，对应激的感知存在个体差异，并且对于应激的有无或强弱 也没有明确的指标。本发明人通过目前的研究发现应激会导致IL-18 等的细胞因子升高，揭示了以IL-18作为应激级联(stress cascade)的 顶端的信号转导通路，使对应激的客观评价成为可能(参照专利文献 2、非专利文献21～23)。

专利文献1：日本特开平8-193098号公报

专利文献2：国际公开第2006/003927号小册子

非专利文献1：Dugue，B.等.Scand.J.Clin.Invest.53，555～561(1993)

非专利文献2：Kiecolt-Glaser，J.K.等.Proc.Natl.Acad.Sci.USA93， 3043～3047(1996)

非专利文献3：Endocrinology133，2523～2530(1993)

非专利文献4：Schubert，C.等.Psychosom.Med.61，876～882(1999)

非专利文献5：Zhou，D.等.Nature378，88～91(1995)

非专利文献6：Nakanishi，K.等.Annu.Rev.Immunol.19423～474 (2001)

非专利文献7：Hoshino，T.等.J.Immunol.162，5070～5077(1999)

非专利文献8：Dinarello，C.A.等.J.Leukoc.Biol.63，658～664(1998)

非专利文献9：Blease，K.等.Inflamm.Res.50，552～560(2001)

非专利文献10：Adachi，O.等.Immunity9，143～150(1998)