[发明专利]生产无特定菌状态的禽蛋和禽类的改进方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种培育无特定菌状态的禽类的改进方法。特别地，本发明涉及提高以无菌方式从亲代禽类腹腔取出的且处于无菌状态的蛋的孵化率和存活率的方法。本发明另外涉及无特定菌状态的禽蛋的生产。

在本说明书中，术语“无污染的”和“无菌的”可互换地使用。这些术语被非常广泛地使用，并且是指可以被禽类携带的许多病原体和传染源(infection)，所述禽类特别是家禽例如鸡、火鸡和其它禽类，这些禽类被广泛用于生产繁殖用禽群，以生产用于商业生产的受精蛋，和生产供人类消费的蛋和肉。此外，这些蛋和禽类用于生产各种各样的生物学物质，包括疫苗、抗体、单克隆抗体、纤维原细胞和蛋白质，都用于人和动物的治疗和预防应用。它们另外广泛地用于诊断性试验和生产转基因的蛋和禽类。这些应用中有许多都需要蛋和/或由它们产生的禽类不含所有的或指定的污染物，例如传染源，包括各种寄生虫、细菌、支原体、病毒、反向病毒、朊病毒、DNA和RNA片段。有时，病毒可以是小病毒，包括微小核糖核酸病毒和细小病毒。经常使蛋污染的一些细菌包括梭状芽孢杆菌和肠道杆菌。有许多非病原性生物体应该被控制。同样地，许多微生物，包括寄生虫、需氧菌和厌氧菌、共生微生物，和与消化道和泄殖腔有关的微生物，都是不希望有的。同样地，支原体、病毒(包括反向病毒、朊病毒)、真菌、酵母菌和霉菌也都是不希望有的。

因此，术语“无特定污染”或“无菌状态”可以包括这些中的一些或其全部，并且比仅仅无指定的病原体的含义宽泛得多。例如，常规的无特定病原体(SPF)没有指定不含某些病毒，并且实际上可以被细菌和病毒污染。因此，对于某些应用，这些可能是足够的。蛋和禽类的预定用途决定了所述蛋或禽类必须不含哪些污染物。常规的无菌蛋和一些无特定病原体的蛋是通过用化学品(包括消毒剂和抗生素)处理自然产下的鲜蛋并且将它们置于隔离器中得到的。这种自然产下的蛋得自经过挑选的亲代种禽(parent stock birds)。尽管这些方法在生产无特定病原体(SPF)的蛋方面相对成功，但是它们在生产无污染的蛋方面没有获得真正的成功。毕竟，化学品不能除去来自例如在即将产蛋前和/或刚刚产蛋之后，以及和在灭菌之前进入蛋壳孔中的细菌的污染。无论是无特定病原体的、无菌的或限菌的蛋的污染都导致不符合技术条件，并且在许多情况中导致商业价值和应用的损失。

背景技术

欧洲专利0 295 964描述了体外鸟禽胚胎孵化技术，其相当详细地描述了蛋的胚胎发育。该说明书涉及在胚胎被转移出蛋壳之后在一个密闭的容器中孵化。实际上，在该说明书中，使用的容器优选是蛋壳的一部分，所述蛋壳选自与被孵化蛋为同种的蛋壳，或者，根据该发明，所述蛋壳选自相似母鸡的蛋壳的一部分。该发明涉及家禽的基因工程，但也涉及研究鸟禽类发育的基本机制。相似地，欧洲专利0511431公开了母鸡的受精卵的体外孵化方法，在产蛋之后大约1小时内从母鸡输卵管膨大部的上部取出刚刚受精的胚胎，然后孵化。然而，该两个说明书都仅公开了蛋的人工孵化，没有涉及本发明的目的。

欧洲专利申请01650109涉及培育无特定污染状态的禽类的方法。在该申请中公开的一般方法包括圈养作为亲代禽类的禽类，在蛋转移到亲代禽类的泄殖腔之前将蛋从亲代禽类中无菌取出，对蛋进行孵育(incubating)和孵化(hatching)以产生蛋禽。该申请还涉及生产无特定污染状态的禽蛋。

然而，这些方法仍然需要改进。期望增加孵化率和降低活雏禽的死亡率。商业上非常期望获得稳定的结果和包括高孵化率的结果(理想地接近>85％的商业范围，但是确定地稳定在>50％)。这在应对小的、稀有的和价值高的禽群诸如例如转基因禽类时具有特别的并且是关系重大的重要性。

与前述申请相比，本发明提供实现无菌蛋的稳定的高孵化率的改进方法。因此，本发明涉及欧洲专利申请01650109中要求保护的方法的细化和改进。

发明内容

本发明涉及培育无特定菌状态的禽类的改进方法。特别地，本发明涉及特定技术的应用，所述技术可用于确保成熟前的蛋在其壳内在进入泄殖腔之前被取出，并且根据本发明保持无菌。

根据本发明的更一般的实施方案，提供了用于确定何时可以将成熟前的蛋在其壳内从亲代禽类取出的方法。

根据本发明的第一方面，提供了提高在从亲代禽类获得时无菌状态的手术所得蛋的孵化率和存活率的方法，其中所述方法是从亲代禽类取出成熟前蛋之前在无菌环境下进行，并且包括以下步骤：

a)圈养作为亲代禽类的禽类；

b)通过如下步骤判定从亲代禽类取出成熟前的蛋的时间：