[发明专利]在重组宿主中生产化合物

权利要求书

1.重组的Penicillium chrysogenum菌株，其特征在于，选自由penDE、 pcbAB和pcbC组成的列表中的基因被失活。

2.根据权利要求1的菌株，其源自在复合培养基上发酵96小时后生 产多于1.5g/L β-内酰胺的菌株。

3.根据权利要求1到2中任一项的菌株，其中所述基因为pcbC。

4.根据权利要求3的菌株，其还缺乏或具有被失活的基因pcbAB和/或 penDE。

5.根据权利要求1到4中任一项的菌株，其还包含涉及对感兴趣的化 合物的生物合成的基因。

6.在真核重组微生物中生产感兴趣的化合物的方法，包括步骤：

(a)将所述微生物中次级代谢产物生产水平降低50-100％；

(b)向所述微生物中引入异源基因。

7.根据权利要求6的方法，其中所述感兴趣的化合物不是多肽或所述 次级代谢产物不是单端孢毒素。

8.根据权利要求6的方法，其中所述微生物是生产β-内酰胺的微生 物。

9.根据权利要求8的方法，其中所述生产β-内酰胺的微生物来自于 Penicillium的属。

10.根据权利要求9的方法，其中通过进行以下步骤完成步骤(a)：

(a.1)从Penicillium菌株中分离具有单基因组拷贝青霉素基因簇的隔离 群

(a.2)失活来自步骤(a.1)中获得的隔离群的基因pcbC

(a.3)任选地，失活来自步骤(a.1)或(a.2)中获得的隔离群的基因pcbAB 和/或penDE。

11.根据权利要求10的方法，其中步骤(a.2)和/或(a.3)中的所述失活通 过缺失来进行。

12.根据权利要求6-11中任一项的方法，其中所述感兴趣的化合物是 次级代谢产物。

13.根据权利要求1到5中任一项的菌株制备感兴趣的化合物的用 途。

14.根据权利要求13的用途，其中所述感兴趣的化合物通过重组基因 编码的酶生产。

15.根据权利要求13到14中任一项的用途，其中所述感兴趣的化合 物是黄曲霉毒素、阿非迪毒素、制甲羟酶素、麦角胺、烟曲霉毒素、洛伐 他汀、麦角酸、帕克西林、单端孢毒素或6-(2-(1，2，6，7，8，8a-六氢-8-羟基-2- 甲基-1-萘基)乙基)四氢-4-羟基-2H-吡喃-2-酮。

16.根据权利要求13到15中任一项的用途，其中所述感兴趣的化合 物适合于转化为制甲羟酶素和/或普伐他汀。

17.根据权利要求1到5中任一项的菌株用于评价基因生物功能的用 途。