[发明专利]人类角膜内皮细胞的扩增方法有效
申请号: | 200780015455.9 | 申请日: | 2007-04-30 |
公开(公告)号: | CN101437939A | 公开(公告)日: | 2009-05-20 |
发明(设计)人: | 蔡瑞芳 | 申请(专利权)人: | 蔡曜年;蔡瑞芳 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08;G01N1/30;C12N5/02;G01N33/48;C12N5/00;A61M5/32 |
代理公司: | 北京连和连知识产权代理有限公司 | 代理人: | 王伟锋 |
地址: | 美国华*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人类 角膜 内皮 细胞 扩增 方法 | ||
1.一种扩增人类角膜内皮干细胞的方法,该方法由以下步骤组成:
将含人类角膜内皮干细胞的内皮层片置于含羊膜细胞和细胞外间质的羊膜上培养一段足使上述人类角膜内皮干细胞扩增至一适当面积的时间,其中该内皮层片取自于病患的健康眼睛的后轮部组织切片或取自于捐赠者的周边角膜内皮层的小片。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于于该羊膜的基底膜侧上扩增上述角膜内皮干细胞。
3.一种产生用于病患植入部位的外科移植物的方法,该方法由以下步骤组成:
a)将含人类角膜内皮干细胞的内皮层片置于含羊膜细胞和细胞外间质的羊膜上培养一段足使上述人类角膜内皮干细胞扩增至一适当面积的时间,其中该内皮层片取自于病患的健康眼睛的后轮部组织切片或取自于捐赠者的周边角膜内皮层的小片;
b)自该羊膜分离经扩增的细胞;及
c)将步骤b)中得到的该等细胞移植至一载体上,以制得外科移植物。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于上述角膜内皮干细胞在该羊膜的基底膜侧上培养。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于该载体为角膜圆片或羊膜层片。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于该载体厚度小于100μm。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于该载体为角膜圆片。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于该角膜圆片为裸露的角膜后层片。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于该角膜圆片为含有后弹力膜的角膜后层片。
10.一种根据权利要求3所述的方法制备的外科移植物,其特征在于该外科移植物包含由权利要求3所述的方法步骤b)制得的该等细胞以及载体,该等细胞是移植于该载体上,其中该等细胞富含有人类角膜内皮干细胞,而该载体为角膜圆片或羊膜层片。
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