[发明专利]联合淋巴细胞清除剂与CTL及细胞因子的癌症治疗

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求于2006年3月1日提交的美国临时申请第60/778,516 号的优先权。

发明领域

本发明涉及用于治疗患者癌症的方法，所述方法涉及给予活化 的细胞毒性T淋巴细胞、诸如IL-2和IFN-α-2b等细胞因子和作为淋 巴细胞清除剂(lymphodepleting agent)的克拉屈滨(cladribine)和地尼白 介素-毒素连接物(denileukin diftitox)。

发明背景

为易于了解本发明，本节可讨论导致得出本发明的历史和技术背 景，包括对发明人而言可能是独特的观察资料、结论和观点。因此， 本文的背景综述不应该被解释为对于先前技术内容的承认。

业已开发了大量疗法来治疗多种癌症。很多这些努力以化疗方案 为中心。在设计用于治疗转移性黑素瘤的一个特定联合化疗方案中， 据报道用“达特茅斯(Dartmouth)方案”(DTIC、顺铂(cisplatin)、BCNU 和他莫西芬(tamoxifen)联合)的反应率为35-50％，但生存期保持在6-10 个月。对于攻击性大剂量强度化疗¹和用自体骨髓移植补充造血作用， 也报告了高缓解率。然而，平均生存期短，为大约4个月²。

已经注意到在正经历某些免疫疗法的黑素瘤患者中，有少数患者 的生存期有几年数量级的显著改进。这包括用癌症疫苗的主动特异性 免疫治疗以及利用免疫系统的非特异性加强剂例如白介素-2(IL-2)和 干扰素-α(IFN-α)^3-5。

对T细胞限定的黑素瘤肿瘤抗原的鉴别已经导致通过试图增加抗 原特异性细胞免疫应答来靶向癌细胞的临床试验。该方法已用众多免 疫策略进行，其中抗原在免疫原性环境中被递送，以试图在体内诱导 有效T细胞反应。尽管在疫苗试验中已观察到某些临床反应，但所诱 导T细胞反应的数量级通常很低或无法检测到，并与临床反应关联不 大。用癌症抗原对黑素瘤患者进行免疫可增加循环CTL前体的数量； 然而，其与临床肿瘤消退不相关，提示其在功能上或在体内激活方面 有缺陷。

小鼠肿瘤模型研究已证实，涉及对一种或多种肿瘤抗原具特异性 的T细胞的体外免疫的过继性免疫疗法可能有效且毒性最小。施用该 策略治疗人类肿瘤的障碍是鉴别致使肿瘤细胞易遭受CTL介导破坏 的免疫原性抗原。从黑素瘤患者分离肿瘤反应性T细胞，已经导致 CTL所针对的若干肿瘤抗原(表位)的鉴别。这些抗原包括酪氨酸酶、 MART-1/Melan A、gp100和MAGE。其中酪氨酸酶和MART-1几乎 普遍在黑素瘤上表达，因此代表了所期需的过继性免疫疗法的靶选择 6-13

过继性T细胞治疗涉及从宿主环境中取出T细胞，其中致耐受性 机制在癌症患者体内有活性，并且导致在该患者群中所证明的无效反 应。可离体(ex vivo)刺激CD8⁺T细胞以产生抗原特异性CTL(参见例 如美国专利第6,225,042号)。早期所用的过继性免疫疗法激活淋巴细 胞来治疗各种癌症¹⁴。最初使用用IL-2离体活化的淋巴因子活化杀伤 细胞(LAK)，后来使用用IL-2离体活化的肿瘤侵润性淋巴细胞(TIL)， 但其功效的确证不明确。这些早期的设有对照的临床试验未能证明使 用离体活化细胞相对于直接将IL-2给予黑素瘤患者的优势。Yee等 (Fred Hutchinson Cancer Research Center)¹⁵和Dudley等(NCI)¹⁶最近的 研究已证明某些过继性T细胞疗法的潜能。这些研究涉及使用对 MART-1或gp100特异性的T细胞克隆和小剂量IL-2或用同种异体饲 养细胞离体扩增的TIL和大剂量IL-2。这些研究证实过继性免疫治疗 作为癌症疗法具有前景，尽管其全面开发受到缺乏用于离体产生治疗 量抗原特异性CD8⁺CTL的可重复方法的阻碍¹⁷。