[发明专利]来自多甲藻属物种的△-5去饱和酶及其在制备多不饱和脂肪酸中的用途

权利要求书

1.一种分离的多核苷酸，包含：

(a)编码具有Δ-5去饱和酶活性的多肽的核苷酸序列，其中在与 SEQ ID NO：2中示出的氨基酸序列进行比较时，基于Clustal W比对方 法，所述多肽具有至少80％的氨基酸同一性；

(b)编码具有Δ-5去饱和酶活性的多肽的核苷酸序列，其中在与 SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3中示出的核苷酸序列进行比较时，基于 BLASTN比对方法，所述核苷酸序列具有至少80％的序列同一性；

(c)编码具有Δ-5去饱和酶活性的多肽的核苷酸序列，其中所述核 苷酸序列在严格条件下与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3中示出的核苷 酸序列杂交；或

(d)(a)、(b)或(c)的所述核苷酸序列的互补序列，其中所述 互补序列和所述核苷酸序列由相同数目的核苷酸组成且100％互补。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述核苷酸序列包含 SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3。

3.根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽的氨基酸序列包含

(a)SEQ ID NO：2；或

(b)与(a)中所述氨基酸序列具有至少一个保守氨基酸置换的不 同的氨基酸序列。

4.一种重组DNA构建体，包含可操作地连接至至少一个调节序 列的根据权利要求1、2或3所述的多核苷酸。

5.一种细胞，其基因组中包含根据权利要求4所述的重组DNA 构建体。

6.根据权利要求5所述的细胞，其中所述细胞选自由植物和酵母 组成的组。

7.一种转化细胞的方法，包括用根据权利要求4所述的重组构建 体转化细胞并选择用根据权利要求4所述的重组构建体转化了的那些 细胞。

8.一种产生转化植物的方法，包括用根据权利要求1、2或3所 述的多核苷酸转化植物细胞并从所述转化植物细胞再生出植物。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述植物为大豆植物。

10.一种转基因种子，其基因组中包含根据权利要求4所述的重 组构建体。

11.一种转基因种子，所述转基因种子从用根据权利要求8或9 所述的方法制备的植物获得。

12.一种在植物细胞中产生长链多不饱和脂肪酸的方法，包括：

(a)用根据权利要求4所述的重组构建体转化细胞；

(b)选择那些产生长链多不饱和脂肪酸的转化细胞。

13.油或副产品，所述油或副产品从根据权利要求10所述的种子 获得。

14.油或副产品，所述油或副产品从根据权利要求11所述的种子 获得。

15.一种在油料种子植物细胞中产生至少一种多不饱和脂肪酸的 方法，包括：

(a)用第一重组DNA构建体和至少一种另外的重组DNA构建体 转化油料种子植物细胞，所述第一重组DNA构建体包含可操作地连接 至至少一个调节序列的、编码至少一种Δ-5去饱和酶多肽的分离的多 核苷酸；所述另外的重组DNA构建体包含可操作地连接至至少一个调 节序列的、编码选自由以下酶组成的组的多肽的分离的多核苷酸：Δ-4 去饱和酶、Δ-5去饱和酶、Δ-6去饱和酶、Δ-8去饱和酶、Δ-12去饱 和酶、Δ-15去饱和酶、Δ-17去饱和酶、Δ-9去饱和酶、Δ-9延长酶、 C_14/16延长酶、C_16/18延长酶、C_18/20延长酶和C_20/22延长酶；

(b)从步骤(a)的所述转化细胞再生油料种子植物；以及

(c)选择从步骤(b)的所述植物获得的那些种子，与从非转化油 料种子植物获得的种子的多不饱和脂肪酸水平相比，所述种子具有改 变的多不饱和脂肪酸水平。