[发明专利]S100A12蛋白作为结肠直肠癌标记的用途

说明书

本发明涉及结肠直肠癌的诊断。描述了S100A12蛋白(＝钙粒蛋 白)作为标记分子在结肠直肠癌诊断中的用途。另外，特别涉及从来 源于个体的粪便样品中，通过测定所述样品中的S100A12来进行结肠 直肠癌诊断的方法。S100A12的测定可用于例如结肠直肠癌的早期检 测和诊断。

尽管检测和治疗手段不断进步，癌症仍构成主要的公众健康威 胁。在各种癌症中，结肠直肠癌(＝CRC)是西方世界最常发生的癌 症之一。

癌症被检测/诊断的越早，则总的存活率越高。特别是对CRC更 是如此。肿瘤在发展期的预后是较差的。超过三分之一的患者在诊断 后五年内将死于进行性疾病，对应的五年存活率约为40％。目前的治 疗仅仅是治愈一部分患者，而且无疑对那些在疾病早期阶段即被诊出 的患者有最好的效果。

对于作为公众健康问题的CRC，有必要开发更为有效的筛选和预 防结肠直肠癌的方法。

目前对结肠直肠癌最早的检测方法包括对粪便血的检测或内窥镜 方法。不过，典型地，在进行粪便血检测前必需有相当大的肿瘤体积。 对于从粪便样品中检测CRC，目前该领域中应用是愈创木脂法便潜血试 验。

近年来，已报道了大量所谓的结肠特异的、或所谓的结肠直肠癌 特异的基因。最主要的相关研究文章或专利申请是基于通过分析结肠 (癌)组织相对于不同组织或邻近的正常组织中的RNA表达模式而 获得的数据。这些方法可概括为差异mRNA展示技术。

作为从mRNA展示技术获得的数据的实施例，可参见并讨论WO 01/96390。该申请描述并请求保护超过200个分离的多核苷酸和相应 的多肽、及其在检测CRC中的用途。但通常已知mRNA水平的差异 并不真实反应相应的蛋白水平。由少量mRNA编码的蛋白可能具有很 高的量，而由丰富mRNA编码的蛋白可能很难被检测和发现。这种 mRNA水平和蛋白水平间缺乏一致性是由于例如mRNA稳定性、翻译 效率、蛋白稳定性等原因造成的。

也发展了新的方法来研究不同组织或健康与疾病组织间蛋白图 谱(protein pattern)的差异，从而鉴定出可用于CRC诊断的候选标记 分子。Brünagel，G.et al.，Cancer Research 62(2002)2437-2442，鉴定 了7种与邻近正常组织相比，在CRC组织中更为丰富的核基质蛋白。 但没有来自个体体液和粪便样品的数据的报道。

WO 02/078636通过表面增强的激光解析附离子化(SELDI)技术 发现了约9个结肠直肠癌相关的斑点。与健康对照血清相比，这些斑 点在来自CRC患者的血清中更经常被发现。但对这种斑点中所含分 子的鉴定，例如(其序列)还是未知的。

尽管在CRC领域中候选蛋白标记的清单很庞大并且仍在增加， 但迄今对这些分子的临床/诊断用途还是未知的。为了具有临床应用价 值，作为单标记的新型诊断标记应该至少与本领域已知的最好的单标 记一样好用。或者，新型标记如果单独使用、或与一个或多个其它标 记联合使用时，应该在诊断灵敏度和/或特异性上更进一步。检测的诊 断灵敏度和/或特异性通常以其受体操作性来进行评估，将在下文进行 详细所述。

例如，目前有一种基于检测肿瘤相关糖蛋白——癌胚抗原(CEA) 的诊断性血液检测，在CRC领域用于辅助诊断。CEA在95％的患有 结肠直肠癌、胃癌和胰腺癌的患者的组织样品中、及大多数乳腺癌、 肺癌及头颈部癌中是增加的(Goldenberg，D.M.et al.，J.Natl.Cancer Inst.(Bethesda)57(1976)11-22)。也在患有非恶性疾病的患者中报道 了增加的CEA水平，而许多患有结肠直肠癌的患者在血清中具有正 常的CEA水平，特别是在疾病的早期阶段(Carriquiry，LA.and Pineyro， A.，Dis.Colon Rectum 42(1999)921-929；Herrera，M.A.et al.，Ann. Surg.183(1976)5-9；Wanebo，H.J.et al.，N.Eng 1.J.Med.299(1978) 448-451)。据报道使用从血清或血浆中测定的CEA来检测复发是有 争议的，但仍被广泛使用(Martell，R.E.et al.，Int.J.Biol.Markers 13 (1998)145-149；Moertel，C.G.et al.，JAMA 270(1993)943-947)。